Wako 和光纯药 011-27991 Anti Iba1, Goat Iba1抗体,山羊源多克隆抗体说明书

Wako 和光纯药 011-27991 Anti Iba1, Goat  Iba1抗体,山羊源多克隆抗体说明书

【Background】
Iba1 is a protein highly expressed in microglia and macrophages with a molecular weight of about 16.7 kDa1). The protein is a commonly known microglial marker in the nervous system.This item is a goat polyclonal antibody that reacts with Iba1.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures or therapeutic use.

小胶质细胞标记
Iba1是一种约17 kDa的蛋白,在神经系统小胶质细胞中特异性表达,经常被用作小胶质细胞标记物。 本产品是识别Iba1的山羊多克隆抗体。

【Description】

[Purification] Purified from the goat serum by antigen-affinity chromatography
[Reactivity] Reacts with Iba1
[Antigen] Synthetic peptide corresponding to the C-terminus of Iba1
[Clone No.] -( polyclonal)
[Species cross reactivity] Mouse and Rat(Other species have not been tested)
[Host] Goat
[Concentration] indicated on the label
[Formulation] TBS

[纯化]通过抗原亲和层析从山羊血清中纯化
[反应性]与Iba1反应
[抗原]对应于Iba1 C末端的合成肽
[克隆号]-(多克隆)
[物种交叉反应]小鼠和大鼠(尚未测试其他物种)
[主持人]山羊
标签上指示的[浓度]
[配方] TBS

【Applications】
Immunohistochemistry( frozen section) 1 : 250-1,000
Immunohistochemistry( paraffin section) 1 : 250-1,000
Western Blot 1 : 1,000
Optimal concentration should be determined by each laboratory
for each application.
【Storage】
Store at -20℃ .  Avoid repeated freeze and thaw.
【Package】
100μL
【Recommended protocol( Immunohistochemistry frozen section)】
Wistar rat or ICR mouse was perfusion-fixed with 4% paraformaldehyde.
replaced sucrose, and prepared 25μm brain section
by microtome.
Wash : 0.3% TritonX-100 in PBS, 5 min × 3

Blocking : 1% BSA and 0.3% TritonX-100 in PBS, 2 hour, RT

Primary antibody : goat anti-Iba1 (1/1000), 1% BSA, and 0.3%

TritonX-100 in PBS, overnight, 4℃

Wash : 0.3% TritonX-100 in PBS, 5 min × 3

Secondary antibody : AlexaFluor488 anti-goat IgG (1/1000,
Jackson Immuno Research Laboratories #705-545-147), 1%
BSA, and 0.3% TritonX-100 in PBS, 2 hour, RT

Wash : 0.3% TritonX-100 in PBS, 5 min × 3

Mount
【Reference】 参考文献
1) Imai, Y., Ibata, I., Ito, D., Ohsawa, K. and Kohsaka, S. : Biochem.
Biophys. Res. Commun., 224, 855( 1996).

◆应用实例 1:免疫组织染色(荧光染色)

Immunohistochemistry (fluorescent staining)

03700482_img04.png

数据提供:国立长寿医疗研究中心榊原老师

样品:阿尔茨海默病模型小鼠(APPNL-G-F 小鼠)大脑新皮层冰冻切片

一抗:抗Iba1,山羊多克隆抗体(1:1,000)

二抗:Alexa Fluor488标记抗山羊IgG

Aβ染色:0.001 % FSB溶液(淀粉样蛋白染色荧光探针)

数据提供:创价大学理工学部中嶋老师

样本:大鼠(左)以及小鼠(右)大脑皮质冰冻切片

一抗:抗Iba1,山羊多克隆抗体(1:250)

二抗:Alexa Fluor488标记抗山羊IgG

◆应用实例 2:免疫组织染色(DAB染色)

03700482_omg02.png

样品:小鼠脑额叶石蜡切片

一抗:抗Iba1,山羊(1:1,000)

二抗:抗山羊IgG,生物素标记

抗原激活:10 mM柠檬酸盐缓冲液(pH 6),90°C,处理10 min

◆应用实例3:蛋白印迹 Western Blotting

03700482_omg03.png

数据提供:创价大学理工学部中嶋老师

样品:大鼠原代培养小胶质细胞  10 μg

样品:大鼠原代培养神经元 10 μg

样品:大鼠原代培养星形胶质细胞  10 μg

样品:大鼠大脑皮层  100 μg

一抗:抗Iba1,山羊(1:1,000)

二抗:抗山羊IgG,HRP标记

抗原 合成肽(Iba1 C端序列相同)
储存缓冲液 TBS
亚型 山羊IgG
物种交叉性 大鼠、小鼠
抗体浓度 0.5-0.6 mg/mL
应用 免疫组化(冰冻切片)1:250-1,000
免疫组化(石蜡切片)1:250-1,000
免疫印迹 1:1,000

◆产品信息

产品编号 产品名称 规格 包装
011-27991 Anti Iba1, Goat

抗Iba1,山羊源多克隆抗体

免疫化学用 100 μL

◆相关产品

产品编号 产品名称 规格 包装
019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)
免疫化学用 50 μg
013-27691 Anti Iba1, Rabbit(for Paraffin Section)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白兔源抗体(石蜡切片)
免疫化学用 50 μg
016-26461 Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素)
免疫化学用 100 μL
013-26471 Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635)
免疫化学用 100 μL
016-20001 Anti Iba1,Rabbit (for Western Blotting)
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹)
免疫化学用 50 μg
012-26723 Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24)
抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)(鼠源)
免疫化学用 10 μL
017-27591 Anti Human Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP27)
抗人 Iba1,单抗(NCNP27)
免疫化学用 10 μL

Wako Y-27632 331752-47-7

Wako Y-27632 331752-47-7
品牌:Wako
品牌中文简称:和光纯药
CAS No.:331752-47-7
储存条件:-20°C

CultureSure® Y-27632 for Cell Culture
CAS RN® : 331752-47-7

030-24021 1mg
036-24023 5mg
034-24024 25mg
030-24026 100mg

CultureSure® 10mmol/l Y-27632 Solution, Animal-derived-free
for Cell Culture
CAS RN® : 331752-47-7
Comparison

035-24593 1mL
039-24591 300uL

Y-27632, MF
for Cell Culture
CAS RN® : 331752-47-7

259-00613 5mg

257-00614 25mg

Y-27632

ES、人类iPS细胞冷冻保存产品

本产品是具有选择性的强力ROCK(Rho-associated coiled-coil forming kinase/Rho结合酶)抑制剂。通过收缩ROCK信号传导系统的血管平滑肌,抑制癌细胞的浸润和控制细胞分化。2007年笹井等人对人类ES细胞培养时,做了许多因分散而抑制细胞死亡的报告。

近年发现,本产品的人类ES细胞、人类iPS细胞冷冻保存液在冷冻保存后解冻,向培养基中添加10 μmol/L,会大幅改善克隆形成率。同时,冷冻保存的ES细胞解冻后,同样用含本产品的培养基进行培养,也可以得到不错的形成率。

◆产品概述

外观:白色-浅黄色、结晶性粉末-粉末

含量(HPLC):98.0%以上

溶解性:水(2.5 mg/mL)

保存:-20℃避光保存(惰性气体密封)

CAS No.:331752-47-7

C14H21N3O・2HCl・H2O=338.27

◆特点

  •   高品质:纯度98.0%以上(HPLC)
  •   价格低廉

◆实验步骤

①hESCs 维持培养

②分离的hESCs在10 μmol/L Y-27632溶液中分裂

③10 μmol/Y-27632中单个hESCs缓慢冷冻

④37℃水浴快速解冻

⑤接种到含有Y-27632的hESCs维持培养基

Y-27632, MF

预防人ES·iPS细胞死亡

Y-27632, MF已于2015年9月注册原药等登记原簿(Master File)的培养基添加物。

和光按照自主规格,严格管理原料,实行制造工程及分析实验验证,确保品质质量。

和光纯药工业是API Corporation唯一认可的Y-27632制造贩卖商。

◆产品概述

外观:白色-浅黄色、结晶性粉末-粉末

含量(HPLC):98.0%以上

溶解性:合格

比旋光度[α]D20(c=1.0,CH3OH):+2.0~+10.0゜

内毒素:低于0.25 EU/mg

活菌数检测:低于20 CFU/g

支原体检测:合格

CAS No.:331752-47-7

C14H21N3O・2HCl・H2O=338.27

◆相关产品

Y-27632 细胞生物学用

CultureSure 低分子化合物

ES·iPS细胞研究用低分子化合物

StemSure Series

液体培养基·细胞培养试剂

相关产品

产品编号 产品名称 规格 包装
030-24021
036-24023
034-24024
CultureSure® Y-27632
本产品已经过支原体检测、内毒素检测、细胞毒性检测。
细胞培养 1 mg
5 mg
25 mg
197-16275 StemSure® D-MEM(High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate 细胞培养 500 mL
197-17571
193-17573
StemSure® hPSC Medium Δ

※不含bFGF

细胞培养 100 mL
100 mL×4
197-16775 StemSure® Serum Replacement (SSR) 细胞培养 500 mL
198-15781 StemSure® 10mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution(x100) 细胞培养 100 mL
195-15791 StemSure® 50mmol/L Monothioglycerol Solution(x100)
能与2ME同等使用的2ME替代品。非毒物。
细胞培养 100 mL
190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution 细胞培养 500 mL
195-16031 StemSure® Freezing Medium 细胞培养 100 mL
199-16051
195-16053
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 细胞培养 106 units
106 units×10
180-02991
186-02993
rBC2LCN-FITC [AiLecS1-FITC] 细胞染色 100 μL

100 μL×5

参考文献

  1. Uehata, M., et al.: Nature, 389, 990 (1997).
  2. Sakamoto, K., et al.: J. Pharmacol. Sci., 92, 56 (2003).
  3. Nishimaru, K., et al.: J. Pharmacol. Sci., 92, 424 (2003).
  4. Watanabe, K., et al.: Nat. Biotechnol., 25, 681 (2007).
  5. Martin-Ibanez. R., et al.: Hum. Reprod, 23, 2744 (2008).
  6. Classen A. D., et al.: Mol. Reprod. Dev., 76, 722 (2009).
  7. Kawamata, M., et al.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 107, 14223 (2010).
  8. Ito, H., et al.: Liver Int., 32, 592 (2012).
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
257-00511 Y-27632 1 mg 细胞生物学  
253-00513 Y-27632 5 mg 细胞生物学  
251-00514 Y-27632 25 mg 细胞生物学  
253-00591 5mmol/L Y-27632 Solution 300 μL 细胞培养  
259-00613 Y-27632, MF 5 mg 细胞培养  
257-00614 Y-27632, MF 25 mg 细胞培养  

 

品牌 产品编号 产品名称 等级 规格 CAS No.
Wako 和光纯药 039-24591 CultureSure® 10mmol/l Y-27632 Solution, Animal-derived-free  CultureSure® 10mmol/l Y-27632 溶液,无动物来源 for Cell Culture 300 ul 331752-47-7
Wako 035-24593 CultureSure® 10mmol/l Y-27632 Solution, Animal-derived-free Cell Culture 1 ml 331752-47-7
Wako 257-00511 Y-27632 for Cellbiology 1 mg 331752-47-7
Wako 253-00591 5 mmol/L Y-27632 Solution for Cell Culture 300 ul 331752-47-7
Wako 030-24021 CultureSure® Y-27632  选择性ROCK抑制剂 for Cell Culture 1 mg 331752-47-7
Wako 036-24023 CultureSure® Y-27632  选择性ROCK抑制剂 for Cell Culture 5 mg 331752-47-7
Wako 034-24024 CultureSure® Y-27632  选择性ROCK抑制剂 for Cell Culture 25 mg 331752-47-7
Wako 259-00613 Y-27632, MF  选择性强效ROCK抑制剂 for Cell Culture 5 mg 331752-47-7
Wako 257-00614 Y-27632, MF  选择性强效ROCK抑制剂 for Cell Culture 25 mg 331752-47-7
Wako 253-00513 Y-27632 for Cellbiology 5 mg 331752-47-7
Wako 251-00514 Y-27632 for Cellbiology 25 mg 331752-47-7

日本老化JaICA中国代理及JaICA品牌介绍

日本老化JaICA中国代理及JaICA品牌介绍

Japan Institute for the Control of Aging (JaICA)

上海金畔生物作为日本 JaICA 老化中国代理商,欢迎新老客户访问日本 JaICA 老化官网或者咨询我们获取更多日本 JaICA 老化产品线价格说明书等信息。

日本老化制御研究所 Jaica代理

日本老化制御研究所自成立以来就对抗衰老进行研究,它是在有助于健康促进的理念下创建的。结果,此研究所在开发DNA氧化损伤测试试剂盒方面取得了很大的成功,并在该领域处于了领先地位。

本研究所现在销售许多氧化应激相关产品,这些产品可应用于医学,药学,生化学,食品科学等。它还利用其独特的技术开展检测服务。随着社会老龄化的发展,预防医学与抗衰老引起了越来越多的关注,在这些领域中,我们研究所将会通过开发和提供研究产品来助于营造一个健康,长寿的社会。

产品类型:

1. DNA氧化检测产品;

2. 蛋白氧化检测产品;

3. 脂肪氧化检测产品;

4. 抗氧化检测产品。

特性:

1. 高专一性、高灵敏性;

2. 不与RNA损伤产生交叉反应;

3. 易于操作、简单快速;

4. 无需昂贵的设备和样品预处理。

日本Jaica

The Japan Institute for the Control of Aging has conducted research into control of aging since its foundation under the doctrine of contributing health promotion. As a result, the institute succeeded in developing a DNA oxidative damage measuring kit, thus taking the lead for this field.
The institute now sells many products related to oxidative stress, and such products are utilized in the fields of medicine, pharmacy, biochemistry, food sciences, etc. The institute also performs assay services utilizing its unique technologies. Preventive medicine and anti-aging are receiving increased attention with the advancement of aging society. In these areas, our Institute will contribute to realizing a healthy, long-lived society by developing and supplying research products.

独特的氧化应激标记物

日本控制衰老研究所从事衰老研究,目的是促进人类健康。该研究所成功研发了检测DNA氧化损伤的试剂盒,并且在这个领域处于领先地位。该研究所目前销售很多关于氧化应激研究方面的产品。这些产品在医学,药学,生物化学和食品方面都有运用。该研究所也提供定制服务。随着步入老龄化社会,预防医学和抗衰老收到越来越多的关注。

JaICA从事试剂盒销售和定制服务。试剂盒部分,研究所研发和生产用于检测氧化应激标记物的试剂盒。单抗和ELISA试剂盒可用于检测活性氧产生的氧化损伤产物。定制服务部分,使用本研究所研发的产品和积累的经验检测尿液和血液样品,检测食品。近来预防医学、抗衰老和功能性食品的关注越来越多,因此全球医院,大学,研究所、食品企业和制药企业分析氧化应激标记物,衰老相关激素和矿物质需求也越来越多。

◆氧化应激标记物概况

类型 产品名称 运用 备注
尿液 血清 组织
DNA 氧化 8-OHdG   Check ELISA Kit 是(动物) 普遍使用的氧化应激标记物
检测时间:大概3.5小时
8-OHdG   Check ELISA Kit (High Sensitivity) 是(动物) 人血清、组织和培养细胞的更低检测限。
anti-8-Hydroxy-2′-deoxyguanisine   [8-OHdG],mAb(N45.1) 8-OHGua/8-OHG低交叉反应性
anti-Thymidine   Glycol [TG], mAb (2E8) DNA特异性氧化应激标记物
脂类氧化 Hexanoyl-Lys   [HEL] ELISA Kit n:6 多不饱和脂肪酸早期氧化的新标记物
anti-Hexanoyl-Lys   [HEL], mAb (5F12) 免疫组化,免疫印迹和ELISA
anti-Hydroxy-2-nonenal   [4-HNE], mAb(HNEJ-2) 普遍使用的脂类氧化标志物
anti-Acrolein   [ACR], mAb (5F6) 免疫组化, 免疫印迹 和 ELISA.
anti-Malondialdehyde   [MDA], mAb (1F83) 免疫组化 和 免疫印迹
anti-4-Hydroxy-2-hexenal   [4-HHE], mAb (HHE53) 免疫组化
anti-Crotonaldehyde   [CRA], mAb (82D3) 免疫组化
anti-Methylglyoxal   [MG], mAb (3C) 免疫组化
anti-7-Ketocholesterol   [7-KC], mAb (35A) 胆固醇氧化标记物
蛋白氧化 Dityrosine   [DT] ELISA Kit 蛋白氧化新型标记物。检测时间:过夜 + 1.5小时。
anti-Dityrosine   [DT], mAb (1C3) 免疫组化, 免疫印迹 和 ELISA.
anti-Dibromo-tyrosine   [DiBrY], mAb (3A5) 炎症相关的蛋白氧化标记物
抗氧化检测 Total   Antioxidant Capacity [PAO] Test Kit Food
Samples
血清、食物和酒水总抗氧化检测,能够疏水和亲水的抗氧化剂。

日本关东化学kanto 1330-43-4 四硼酸钠 Sodium tetraborate

日本关东化学kanto 1330-43-4 四硼酸钠 Sodium tetraborate

日本关东化学代理商–上海金畔生物

代理优势:货期2-3周。

欢迎访问关东化学株式会社Kanto官网或者咨询我们获取更多产品信息。

日本关东化学kanto 1330-43-4 四硼酸钠 Sodium tetraborate

Product No. 37129-10
Product name Sodium tetraborate, anhydrous
Grade Guaranteed reagent
Purity >98.0%(T)
Package 250g
Price ¥7,000
Stock 20<=
Byname Disodium tetraborate, anhydrous
Sodium borate, anhydrous
Sodium borate, anhydrous
Formula Na2B4O7
Formula weight 201.22
CAS No. 1330-43-4

日本关东化学kanto 1330-43-4 四硼酸钠 Sodium tetraborate

Product No. Product Name Grade Package
37128-02 Sodium borate, glass   500g
37129-10 Sodium tetraborate, anhydrous Guaranteed reagent 250g
37129-11 Sodium tetraborate, anhydrous Extra pure 250g
38002-1B Sodium tetraborate, anhydrous for X‐ray fluorescence analysis 1kg
6309-1M Sodium tetraborate, anhydrous SuprapurR 25g
20629-2A Sodium tetraborate, anhydrous   100g
20629-3A Sodium tetraborate, anhydrous   500g
37996-08 0.01mol/L Sodium tetraborate solution for water quality analysis 500mL

日本关东化学Kanto 37565-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm

日本关东化学Kanto 37565-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm

日本关东化学代理商–上海金畔生物

代理优势:货期2-3周。

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日本关东化学Kanto 37565-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm

Product No. 37565-79
Product name Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm
Grade for column chromatography
Package 1kg
Price ¥9,000
Stock 100<=
Product instructions particle size 63μm~210μm
CAS No. 7631-86-9

日本关东化学Kanto 7631-86-9 二氧化硅

二氧化硅(IV), 40%水胶态分散体 Silicon dioxide

CasNo:7631-86-9  MDL:MFCD06660073  分子式:O2 Si  分子量:60.0800

Product No. Product Name Grade Package
37038-02 Silica gel, Blue, big granule 500g
37038-84 Silica gel, Blue, big granule 13.5kg
37039-02 Silica gel, Blue, middle granule 500g
37039-84 Silica gel, Blue, middle granule 13.5kg
37044-02 Silica gel, White, big granule 500g
37045-02 Silica gel, White, middle granule 500g
37046-02 Silica gel, White, small granule 500g
37047-02 Silica gel, Orange, middle granule 500g
37047-82 Silica gel, Orange, middle granule 12.5kg
37489-08 Silica gel, Blue, middle granule, NeoBLUER for drying 500g
37489-84 Silica gel, Blue, middle granule, NeoBLUER for drying 12.5kg
37556-96 Silica gel 60N,spherical neutral,particle size 40‐50μm,60mL for flash chromatography 20pieces
37558-79 Silica gel 60, spherical, particle size 100‐210μm for column chromatography 1kg
37558-84 Silica gel 60, spherical, particle size 100‐210μm for column chromatography 10kg
37558-85 Silica gel 60, spherical, particle size 100‐210μm for column chromatography 25kg
37559-79 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐100μm for flash chromatography 1kg
37559-84 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐100μm for flash chromatography 10kg
37559-85 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐100μm for flash chromatography 25kg
37560-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 100‐210μm for column chromatography 1kg
37560-84 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 100‐210μm for column chromatography 10kg
37560-85 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 100‐210μm for column chromatography 25kg
37561-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐100μm for flash chromatography 1kg
37561-84 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐100μm for flash chromatography 10kg
37561-85 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐100μm for flash chromatography 25kg
37562-79 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐50μm for flash chromatography 1kg
37562-84 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐50μm for flash chromatography 10kg
37562-85 Silica gel 60, spherical, particle size 40‐50μm for flash chromatography 25kg
37563-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐50μm for flash chromatography 1kg
37563-84 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐50μm for flash chromatography 10kg
37563-85 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 40‐50μm for flash chromatography 25kg
37564-79 Silica gel 60, spherical, particle size 63‐210μm for column chromatography 1kg
37564-84 Silica gel 60, spherical, particle size 63‐210μm for column chromatography 10kg
37564-85 Silica gel 60, spherical, particle size 63‐210μm for column chromatography 25kg
37565-79 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm for column chromatography 1kg
37565-84 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm for column chromatography 10kg
37565-85 Silica gel 60N, spherical neutral, particle size 63‐210μm for column chromatography 25kg
37571-79 Silica gel 60N, irregular neutral, particle size 40‐63μm for flash chromatography 1kg
37572-79 Silica gel 60N, irregular neutral, particle size 63‐200μm for column chromatography 1kg
7730-1M Silica gel 60GF254 (type60) for thin layer chromatography 500g
7730-2M Silica gel 60GF254 (type60) for thin layer chromatography 1kg
7730-3M Silica gel 60GF254 (type60) for thin layer chromatography 5kg
7731-2M Silica gel 60G (type60) for thin layer chromatography 1kg
7731-3M Silica gel 60G (type60) for thin layer chromatography 5kg
7736-2M Silica gel 60H (type60) for thin layer chromatography 1kg
7736-3M Silica gel 60H (type60) for thin layer chromatography 2.5kg
7739-2M Silica gel 60HF254 (type60) for thin layer chromatography 1kg
7747-1M Silica gel 60PF254 for preparative thin layer chromatography 1kg
7747-2M Silica gel 60PF254 for preparative thin layer chromatography 2.5kg
37049-01 Silicon dioxide, amorphous Extra pure 500g
37049-10 Silicon dioxide, amorphous Guaranteed reagent for JIS 250g
37049-13 Silicon dioxide, amorphous, 3N high purity reagent 250g
37049-30 Silicon dioxide, amorphous Guaranteed reagent for JIS 25g
37049-86 Silicon dioxide, amorphous Guaranteed reagent for JIS 5kg
37484-23 Silicon dioxide for advanced material research 100g
37484-43 Silicon dioxide for advanced material research 10g
37484-89 Silicon dioxide for advanced material research 5kg
49525-70 Silicon oxide, powder 25g
49525-71 Silicon oxide, powder 100g
49525-72 Silicon oxide, powder 500g
49525-73 Silicon oxide, powder 1kg
40373-1A CAB‐O‐SILR M‐5 for liquid scintillation counting 150g
37563-23 Silica gel, water content 5% for environmental analysis 100g
24167-1A Silica gel, for chromatography, 0.200‐0.500 mm, 40 A 1kg
24167-2A Silica gel, for chromatography, 0.200‐0.500 mm, 40 A 250g
25509-79 Mightysil Si 60 (40‐50μm) for flash chromatography 1kg
25509-85 Mightysil Si 60 (40‐50μm) for flash chromatography 25kg
41929-1A Silica gel, for chromatography, 0.060‐0.200 mm, 60 A 1kg
41929-2A Silica gel, for chromatography, 0.060‐0.200 mm, 60 A 5kg
41929-3A Silica gel, for chromatography, 0.060‐0.200 mm, 60 A 250g
49525-74 Silicon oxide, powder 25g
49525-75 Silicon oxide, powder 100g
49525-76 Silicon oxide, powder 500g
49525-77 Silicon oxide, powder 1kg

Wako 二噁英检测解决方案

Wako 二噁英检测解决方案

二噁英,也常写作二恶英,是众所周知的致癌致畸致突变的“三致”物质,其在环境中非常稳定并有极高毒性,对其控制分析和检测至关重要。上海金畔生物推出各种二恶英分析专用前处理柱、试剂及标准品,适用于环境监测,垃圾处理,食品安全,金属处理和生产,化工品生产等行业使用。

详细信息:

概述
来源
危害
色谱分析
分析流程
专用前处理柱
前处理专用溶剂
专用试剂
专用耗材
标准品、对照品系列
气相色谱柱
参考标准
二噁英分析解决方案
概述
二噁英类(Dioxins)是由多氯代二苯并-对-二噁英(polychlorinateddibenzo-p-dioxins,简称PCDDs)和多氯代二苯并呋喃(polychlorinateddibenzofurans,简称PCDFs)两大类化合物组成。PCDDs是由2个氧原子联结2个被氯原子取代的苯环,PCDFs是由1个氧原子联结2个被氯原子取代的苯环,每个苯环上都可以取代1-4个氯原子(见下图),从而形成众多的同类物,其中PCDDs有75种同类物,PCDFs有135种同类物,所以,二噁英类包括210种同类物,是首批被列入《斯德歌尔摩公约》的12种持久性有机污染物之一。目前研究最为充分的是17种2,3,7,8位被氯原子取代的二噁英类同类物,包括7种四至八氯代二苯并-对-二噁英以及10种四至八氯代二苯并呋喃。其中,2,3,7,8-四氯代二苯并-对-二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo[b,e][1,4]-dioxin,2,3,7,8-TCDD)是目前所有已知的二噁英类中毒性最强的单体。
国外对于二噁英类的定义更为宽泛,某些共平面结构的多氯联苯(coplanarpolychlorinatedbiphenyles, Co-PCBs)在化学结构、生化和毒理学毒性方面与2,3,7,8-TCDD十分相似,被称为“二噁英类PCBs(dioxin-likePCBs)”。世界卫生组织(WHO)把12种共平面的多氯联苯也作为二噁英类来对待,日本、美国等发达国家的标准中二噁英类实际包含三个组成部分:多氯代二苯并-对-二噁英(PCDDs)、多氯代二苯并呋喃(PCDFs)和共平面多氯联苯(Co-PCBs)。
二噁英类非常稳定,熔点较高,极难溶于水,可以溶于大部分有机溶剂,是无色无味的脂溶性物质,非常容易在生物体内积累,自然界的微生物和水解作用对其影响很小,环境中的二噁英很难自然降解消除。

PCDDs和PCDFs的基本结构
来源
二噁英类常以微小的颗粒存在于大气、土壤和水中,排放源有很多,包括化工冶金工业、垃圾焚烧、造纸以及生产杀虫剂等产业。各类生活垃圾、危废、医疗废物在焚烧过程中所产生废气、飞灰和底灰以及与氯相关的行业生产,诸如化工、农药、纸浆漂白等相关行业,均可能产生二噁英有机污染物,其中垃圾焚烧不完全时可大量地产生二噁英的排放。自1999年比利时发生动物饲料二恶英污染事件后,二恶英更是倍受瞩目,一时成为全球范围的热点。垃圾焚烧厂烟气中二恶英的排放和监测,比以往任何时候都更受关注。大多数生活垃圾焚烧企业在建设和运行阶段,都会面临周边公众的二恶英恐慌和抵制。要建设生活垃圾焚烧厂,就不能也无法回避二恶英问题。垃圾焚烧炉排放的二噁英类物质在过去几十年内得到了很好的控制,目前许多国家和地区,钢铁工业已经取代垃圾焚烧成为最主要的二噁英工业污染源。钢铁行业二恶英污染主要来自铁矿石烧结和电弧炉炼钢过程,含氯杂质在冶炼过程中受到过渡金属催化剂的作用,产生二恶英类副产物。

上世纪80年代,瑞典和美国先后在造纸厂排出的废水中发现了此类物质。此后科学家们证明纸浆和纸制品中也存在二恶英,证实了造纸工业是二恶英类污染物的一个重要来源。许多研究表明,二恶英在造纸工业中主要存在于制浆漂白过程、外部添加剂、含氟漂白纸浆制品和造纸厂废水处理的污泥中。

联合国环境规划署(UNEP)编制了二噁英和呋喃排放识别和量化标准工具包,共列出了9大类主要源类别,且每一大类别中分别包括若干子类别:
1 废物焚烧:如城市固体废物、危险废物、医疗废物、下水道污泥的焚烧;
2 铁和有色金属生产:如铁矿石烧结、焦炭生产、钢铁铸造、铜、铝、铅、锌、镁的生产;
3 供热和发电:如化石燃料电厂、生物质电厂等;
4 矿物制品生产:如水泥、石灰、砖、玻璃、陶瓷的生产、沥青混合;
5 交通运输:如柴油发动机、四冲程发动机、二冲程发动机、重油燃料发动机;
6 露天焚烧过程:如生物质燃烧、焚烧燃烧或火灾;
7 化学品和消费品生产和使用:如纸浆造纸生产、化学工业、石油工业、纺织生产、制革;
8 混杂过程:生物质干燥、焚尸炉、熏蒸室、干洗、吸烟;
9 处置:如填埋和倾废、污水处理、露天泼水、堆肥、废油处理(非加热型);

危害
二噁英类污染物是一类具有强烈致癌、致畸、致突变(三致作用)的有毒物质,它的毒性是氰化物的130倍、砒霜的900倍,有“世纪之毒”之称。
二噁英类还具有强烈的内分泌干扰毒性,对人类健康具有极大的危害。能够引起雌性动物卵巢功能障碍,起到抑制雌激素的作用,使雌性动物不孕、胎仔减少、流产等;能够引起雄性动物的精细胞减少、成熟精子退化、雄性动物雌性化等。
二噁英类有明显的免疫毒性,可引起动物胸腺萎缩、细胞免疫与体液免疫功能降低等。
二噁英类还能引起皮肤损害,在暴露的实验动物和人群身上可观察到皮肤过渡角化、色素沉着以及氯痤疮等的发生。
二噁英类染毒动物可出现肝脏肿大、实质细胞增生与肥大现象,严重时可导致变性和坏死。
二噁英类危害的另一个特点是它的长期性和隐匿性,在表现出明显的症状之前有一个漫长的潜伏过程,它还可能影响受害者的子孙后代。
根据动物实验与流行病学研究的结果,1997年国际癌症研究机构(IARC)将2,3,7,8-TCDD确定为Ⅰ类人类致癌物。
色谱分析
二噁英类的分析测定被视为现代有机分析的难点,它要求超微量多组分定量分析,分析仪器多采用气相色谱/质谱联用仪(GC/MS)。测定环境二噁英类必须具备的技术条件包括:有效的采样技术、从样品中提取出10-12~10-15量级的二噁英类、从初步的粗提物中分离去除其它有机物、分离出与二噁英类性质接近的其它氯代芳香族有机物、高效分离二噁英类异构体、可靠定性和准确定量以及安全防毒的实验条件等。
美国、日本和欧洲均制定了环境二噁英类的排放标准和有关监测分析方法标准,而且针对不同基质或对象(来源)的样品有不同的二噁英类标准分析方法,这主要是因为基质不同的二噁英类样品其前处理方法可以有很大的不同。
现代分析方法采用分辨率10000以上的高分辨质谱仪(HRMS),并使用17种以上的同位素标记二噁英类作为内标物质,可以对全部17种2,3,7,8-位氯代异构体准确定量,大大提高了分析灵敏度和准确性。这些二噁英类分析方法在使用同位素标记化合物作为内标物质、液-液萃取和索氏提取、硅胶柱净化、HRGC/HRMS定性和定量等方面的技术路线基本是一样的。以下是日本二噁英类标准分析方法的简单介绍:

WHO -TEF参考标准

Congener
WHO-TEF
Congener
WHO-TEF
PCDDs
Non-ortho-PCBs
2,3,7,8-TCDD
1
3,3’,4,4’-TCB (77)
0.0001
1,2,3,7,8-PeCDD
1
3,4,4’,5-TCB (81)
0.0001
1,2,3,4,7,8-HxCDD
0.1
3,3’,4,4’,5-PeCB (126)
0.1
1,2,3,6,7,8-HxCDD
0.1
3,3’,4,4’,5,5’-HxCB (169)
0.01
1,2,3,7,8,9-HxCDD
0.1
Mono-ortho-PCBs
1,2,3,4,6,7,8-HpCDD
0.01
2,3,3’,4,4’-PeCB (105)
0.0001
OCDD
0.0001
2,3,4,4’,5-PeCB (114)
0.0005
PCDFs
2,3’,4,4’,5-PeCB (118)
0.0001
2,3,7,8-TCDF
0.1
2’,3,4,4’,5-PeCB (123)
0.0001
1,2,3,7,8-PeCDF
0.05
2,3,3’,4,4’,5-HxCB (156)
0.0005
2,3,4,7,8-PeCDF
0.5
2,3,3’,4,4’,5’-HxCB (157)
0.0005
1,2,3,4,7,8-HxCDF
0.1
2,3’,4,4’,5,5’-HxCB (167)
0.00001
1,2,3,6,7,8-HxCDF
0.1
2,3,3’,4,4’,5,5’-HpCB (189)
0.0001
1,2,3,7,8,9-HxCDF
0.1
IUPAC: International Union of Pure and Applied Chemistry
2,3,4,6,7,8-HxCDF
0.1
1,2,3,4,6,7,8-HpCDF
0.01
TEF: Toxic Equivalence Factor
1,2,3,4,7,8,9-HpCDF
0.01
OCDF
0.0001

日本工业标准JIS K0311:日本在1999年修订的最新版固定源排气中二噁英类标准分析方法。该标准建立在欧洲和美国现有标准的基础之上,并结合了日本近十年的研究经验,具有更强的针对性和良好的可操作性,有严格的质量控制措施。采用了世界卫生组织WHO的新规定,将共平面多氯联苯(co-PCBs)也纳入了二噁英的范畴,要求同时分离和测定样品中的二噁英类和co-PCBs。

日本工业标准JIS K0312:工业废水和污水中的二噁英类标准分析方法。
常规分析方法是在200余种异构体中分离出17种有明显毒性的二噁英类,分别测定其浓度或含量。将浓度或含量乘以每种二噁英的毒性因子(TEF,Toxic Equivalence Factor,见下表)可以得到总毒性当量(TEQ, Toxic Equivalents)。该方法的一般程序包括采样、提取、净化、定性定量。为了除去大量干扰物质,在进行GC/MS分析前,需对各种样品进行预处理,可使用多层硅胶柱层析色谱,活性氧化铝层析色谱,活性炭包埋/混合硅胶柱层析色谱等多种方法。

分析流程

二噁英检测专用前处理柱

货号 品名
规格
价格
295-41651 Multilayer Silica Gel 二噁英多层硅胶前处理小柱(WAKO)
5ea
询价
28397-U Multilayer Silica Gel二噁英前处理多层硅胶柱(Sigma)
5支/盒
询价
289-84231 Multilayer Silica Gel 多层硅胶前处理小柱(特殊定制)(WAKO)
5ea
询价
293-42551 Presep® Alumina, Activated DX 活性氧化铝前处理小柱
5个
询价
297-43051 Active Carbon-impregnated Silica Gel (Reverse Column) 活性炭包埋反向萃取前处理小柱(WAKO)
5个
询价

01894-96

Active carbon‐dispersed silica gel reversible column 二噁英检测专用活性炭分散硅胶反相柱(kanto)
1pack (5pieces)
询价

二噁英检测前处理专用溶剂

订货号 英文名称 中文名称 规格/用途
规格
价格
010-17831 Acetone 丙酮 二噁英前处理
1L
询价
016-17833 Acetone 丙酮 二噁英前处理
3L
询价
048-28543 Decane 癸烷 二噁英前处理
2mL×5
询价
042-28541 Decane 癸烷 二噁英前处理
100mL
询价

二噁英检测专用试剂

订货号 英文名称
规格
价格
160-21831 Phthalocyanine Immobilized Silica Gel
5g
询价
168-21832 Phthalocyanine Immobilized Silica Gel
25g
询价
167-19251 2% Potassium Hydroxide-impregnated Silica Gel / KOH 涂覆硅胶(wako)
100g
询价
197-11611 10% Silver Nitrate-impregnated Silica Gel/ AgNO3涂覆的硅胶(wako)
100g
询价
010-19411 Active Carbon-blended Silica Gel
10g
询价
016-19413 Active Carbon-blended Silica Gel
100g
询价
019-11941 Active Carbon-impregnated Silica Gel
10g
询价
197-13811 55% Sulfuric Acid-impregnated Silica Gel (wako)
100g
询价
191-11631 44% Sulfuric Acid-impregnated Silica Gel / H2SO4涂覆的硅胶 (wako)
100g
询价
194-11621 22% Sulfuric Acid-impregnated Silica Gel /H2SO4涂覆的硅胶(wako)
100g
询价
21318-U 2% Potassium Hydroxide-impregnated Silica Gel / KOH 涂覆硅胶(Supelco)
100 g
询价
21319-U 10% Silver Nitrate-impregnated Silica Gel / AgNO3涂覆的硅胶 (Supelco)
100 g
询价

21341-U

22% Sulfuric Acid-impregnated Silica Gel / H2SO4涂覆的硅胶 (Supelco)
100 g
询价

21334-U

44% Sulfuric Acid-impregnated Silica Gel / H2SO4涂覆的硅胶 (Supelco)
100 g
询价

AJL0584A

50目硅胶 (seebio)
100 g
询价

238-01781

Wakogel DX (Silica Gel)  WAKO硅胶
100 g
询价

二噁英检测专用耗材

货号 品名 说明
包装
KVX0611A 微石英超洁净过滤筒 二噁英污染源采样
25支/盒
291-41751 Presep(R) Cylinder adapter (PTFE) 合硅胶时,连接节流阀(Luser stop valve)和贮液槽(盛放溶剂)的接头
5EA
297-41753 Presep(R) Cylinder adapter (PTFE) ①安装于Presep活性炭埋藏硅胶(反相萃取柱)样品洗脱侧的接头
20EA
291-42851 Presep(R) Column Joint(TS15/25) ②通过安装通用分液漏斗,可作为洗提液注入侧接头使用
1 EA
297-42951 Presep(R) Column Joint (TS19/38) 连接Presep活性炭埋藏硅胶(反相萃取柱)和洗提液注入侧的接头
1 EA
295-42251 Presep(R) Column adapter (TS15/25) (PTFE)
1EA
299-45951 Presep(R) Column adapter (TS19/38) (PTFE) 再灌装Presep Column Adapter用的铁氟龙密封(白色)
1EA
298-50051 Presep(R) Column adapter Packing (PTFE)
5EA
294-50151 Presep(R) Cock adapter Packing  (PTFE) 再灌装PresepCock Adapter用的铁氟龙密封(褐色)
5EA
295-42751 Presep(R) Column Reducer(PTFE) 和活性炭包埋硅胶柱连接,洗脱液注入的接头
1 EA
299-42151 Presep(R) Cock adapter (玻璃) 安装于Presep多层硅胶柱样品洗脱侧(萃取柱下部)的带栓接头
1EA
二噁英检测标准品、对照品系列
上海金畔生物所提供的二噁英检测专用标准品、对照品系列,均符合美国环保署EPA、欧盟EN-1948、日本国家标准JISK规范、国标GBHJ77-2008。
货号 产品描述
规格
品牌
EDF-5304 DIOXIN & FURAN CLEAN UP SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EDF-5454 DIOXIN AND FURAN CLEANUP/SAMPLING STANDARDS (CS/SS) (37CL4, 96%; 13C12, 99%)
5 ML
CIL
EDF-5454-A DIOXIN AND FURAN CLEANUP/SAMPLING STANDARDS (CS/SS) (37CL4, 96%; 13C12, 99%)
5 ML
CIL
EDF-5393 DIOXIN CLEAN UP SPIKE (UNLABELED/13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EDF-5395 DIOXIN SAMPLING SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EDF-5395-0.5X DIOXIN SAMPLING SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EF-5394 DIOXIN SYRINGE SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EDF-5392-1 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS1 (UNLABELED/13C12, 99%)
0.2 ML
CIL
EDF-5314-1 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS1 (13C12, 99%/UNLABELED)
0.2 ML
CIL
EDF-5314 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS1-CS5  (13C12, 99%/UNLABELED)
5 X 0.2 ML
CIL
EDF-5392 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS1-CS6 (UNLABELED/13C12, 99%)
6 X 0.2 ML
CIL
EDF-5392-2 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS2 (UNLABELED/13C12, 99%) IN NONANE
0.2 ML
CIL
EDF-5314-2 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS2 (13C12, 99%/UNLABELED)
0.2 ML
CIL
EDF-5392-3 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS3 (UNLABELED/13C12, 99%)
0.2 ML
CIL
EDF-5314-3 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS3 (13C12, 99%/UNLABELED)
0.2 ML
CIL
EDF-5392-4 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS4 (UNLABELED/13C12, 99%)
0.2 ML
CIL
EDF-5314-4 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS4 (13C12, 99%/UNLABELED)
0.2 ML
CIL
EDF-5392-5 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS5 (UNLABELED/13C12, 99%)
0.2 ML
CIL
EDF-5314-5 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS5 (13C12, 99%/UNLABELED)
0.2 ML
CIL
EDF-5392-6 DIOXIN/FURAN CALIBRATION SOLUTION CS6 (UNLABELED/13C12, 99%)
0.2 ML
CIL
EDF-5493 DIOXIN/FURAN NATIVE MIX ALL (17) 2378 ISOMERS + 1368 TCDD/F + 1379 TCDD UNLABELED
1.2 ML
CIL
EDF-5338 DIOXIN/FURAN SYRINGE SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
EDF-5112-100X DIOXIN/FURAN/PCB INTERNAL SPIKE (13C12, 99%)
1.2 ML
CIL
二噁英检测用气相色谱柱
上海金畔生物供应全系列Agilent气相色谱柱,包括极性或强极性柱、中等极性柱、非极性或弱极性柱以及PLOT色谱柱等。规格齐全,欢迎来电咨询。
货号
色谱柱类型
产品描述
价格
122-0232
美国agilent,DB-210
DB-210 30m, 0.25mm, 0.25um
询价
123-0232
美国agilent,DB-210
DB-210 30m, 0.32mm, 0.25um
询价
123-0233
美国agilent,DB-210
DB-210 30m, 0.32mm, 0.50um
询价
125-0212
美国agilent,DB-210
DB-210 15m, 0.53mm, 1.00um
询价
122-2232
美国agilent,DB-225
DB-225 30m, 0.25mm, 0.25um
询价
123-2232
美国agilent,DB-225
DB-225 30m, 0.32mm, 0.25um
询价
122-2932
美国agilent,DB-225MS
DB-225MS 30m, 0.25mm, 0.25um
询价
122-2962
美国agilent,DB-225MS
DB-225MS 60m, 0.25mm, 0.25um
询价
122-2312
美国agilent,DB-23
DB-23 15m, 0.25mm, 0.25um
询价
122-2332
美国agilent,DB-23
DB-23 30m, 0.25mm, 0.25um
询价
122-2362
美国agilent,DB-23
DB-23 60m, 0.25mm, 0.25um
询价
123-2362
美国agilent,DB-23
DB-23 60m, 0.32mm, 0.25um
询价
125-2332
美国agilent,DB-23
DB-23 30m, 0.53mm, 0.50um
询价
112-88A7
美国agilent,HP-88
HP-88 100m, 0.25mm ID, 0.2um
询价
112-8867
美国agilent,HP-88
HP-88 60m, 0.25mm ID, 0.2um
询价
112-8837
美国agilent,HP-88
HP-88 30m, 0.25mm ID, 0.2um
询价
122-1334
美国agilent,DB-624
DB-624 30m, 0.25mm, 1.40um
询价
123-1364
美国agilent,DB-624
DB-624 60m, 0.32mm, 1.80um
询价
125-1374
美国agilent,DB-624
DB-624 75m, 0.53mm, 3.00um
询价
取样、硅胶预处理、前处理、上样、检测等相关事项的参考标准
1. 环境空气和废气中二噁英类检测 《HJ 77.2-2008同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法
2. 水(污水和废水)中二噁英类检测项目注意事项 《HJ 77.1-2008 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法
3. 土壤、沉淀物中二噁英类检测 《HJ 77.4-2008 同位素稀释高分辨气相色谱-高分辨质谱法
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Wako MagCapture™ Exosome外泌体提取试剂盒(ps亲合法)

Wako MagCapture™ Exosome外泌体提取试剂盒(ps亲合法)

货号:299-77603、293-77601

英文名:MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS

保存条件:2-10℃

规格:kit

MagCapture™Exosome Isolation Kit PS采用磁珠和磷脂酰丝氨酸(PS)结合蛋白(PS亲和法)的方法进行纯化。该方法可以很方便获得高纯度的外泌体和其他来自细胞培养基和体液的EVs(通过正常的微滤方法获得高产量)。如果想要获得更高纯度的外泌体,请使用10,000×g获得上清。该试剂盒利用中性pH的金属螯合试剂,将捕获的EVs从磁珠上洗脱下来,可以获得完整的外泌体和其他EVs。纯化的完整外泌体和其他EVs可用于不同实验,包括电镜分析,纳米粒子追踪分析,EVs的操作和分析。

新型亲和法外泌体提取试剂盒

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS采用磷酯酰丝氨酸(PS)亲和Tim4蛋白固化磁珠(PS亲和法)的方法可以简便快捷地提取高纯度的完整外泌体和其他细胞外囊泡(EVs)。如果想要得到更高纯度的外泌体,请使用10,000×g离心后的上清。

该试剂盒使用含有EDTA的中性洗脱缓冲液将外泌体完整洗脱下来,所提取的完整外泌体和其他EVs可用于不同实验,包括电镜分析(TEM)、纳米粒子追踪(NTA)分析、投喂实验、分子组成(蛋白质、脂质、核酸等)分析等。

 

◆膜表面磷酯酰丝氨酸(PS)亲和法

1.png

Tim4蛋白固化磁珠,在金属离子存在的条件下亲和细胞外囊泡表面的磷酯酰丝氨酸(PS),然后使用含有EDTA的洗脱液进行洗脱,捕获高纯度的完整细胞外囊泡

◆优点・特色

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使用新型亲和提取方法

● 通过PS亲和分子回收

● 低背景值

● 在中性条件下通过螯合试剂进行温和洗脱

※ 可获得高纯度,完整的外泌体

捕获.JPG

无需进行超离

● 使用磁珠改进了操作

● 流程优化

※ 高重复性

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与其他提取方法相比
方法 外囊泡纯度 囊泡状态 可操作性 回收量
PS亲和法 ■■■ 完整 简便稳定 ■■■
超速离心法 ■■ 完整 简便 ■■
聚合物沉淀法 完整 简便快捷 ■■■■
密度梯度离心法 ■■■■ 完整 复杂 ■■
抗体亲和法 ■■■ 不完整 简便稳定 ■■

样品类型:细胞培养上清、血清、血浆、尿液等。

● 可以纯化高纯度和完整的细胞外囊泡

● 可以从细胞上清液、血清、血浆和尿液中纯化外囊泡

● 重复性高,回收量稳定

● 简易操作(约3.5小时)

● 启用多个样品(无需超速离心)

◆产品列表

产品名称 包装规格 保存条件
MagCapture™
Exosome Isolation Kit PS
10次

(产品编号:293-77601)

2次

(产品编号:299-77603)

2-10°C
试剂盒成分

(1) 链霉亲和素磁珠
(2)生物素标记的外泌体捕获
(3)外泌体捕获免疫固定缓冲液
(4)外泌体结合增强剂(×500)
(5)洗涤缓冲液
(6)外泌体洗脱缓冲液
(7)反应管

<10 次>
600 μL×1 管
100 μL×1 管
35 mL×1 瓶
500 μL×1 管
75 mL×2 瓶
5 mL×1 瓶
22 管
<2 次>
120 μL×1 管
20 μL×1 管
7 mL×1 瓶
100 μL×1 管
30 mL×2 瓶
1 mL×1 瓶
1 管

*每套试剂盒能完成5次回收实验,即实际使用量为10×5次/Kit与2×5次/Kit

◆案例•应用

从血清、血浆、尿液中提取的细胞外囊泡的分析

从人血清中提取外泌体的产量比较

使用该试剂盒,超离法和抗体亲和法提取人血清的外泌体,接着用CD9和CD63抗体进行免疫印迹实验。

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● 检测抗体

抗CD9兔多抗,System Bioscience公司

抗CD63兔多抗,System Bioscience公司

● 免疫印迹(WB)数据

各样品结果相当于150μL的血清样本。从100μL提取物中取出15μL,添加5μL的4×SDS样品缓冲液,全部上样。

 

从人EDTA血浆中提取外泌体

分别从1mL的EDTA血浆、EDTA血浆(超滤更换缓冲液)、人血清中提取外泌体,进行WB检测(抗Flotillin2抗体)。

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● 检测抗体

抗Flotillin-2小鼠单抗(29/Fotillin-2),BD Bioscience公司

● 使用样品量

各1mL

● 免疫印迹(WB)数据

各样品结果分别对应150μL样品量。从100μL提取物中取出15μL,添加5μL的 4×SDS样品缓冲液,全部上样。

 

从人尿液中提取外泌体的回收量比较

1mL人尿液分别通过本试剂盒、聚合物沉淀法、超离法进行外泌体回收,并做免疫印迹(WB)检测(抗CD9抗体)。

4.png

● 检测抗体

抗CD9兔多抗,System Biosciences公司

● 使用样品量

各1mL

● 免疫印迹(WB)数据

各样品结果分别对应150μL尿液样品。从100μL提取物中取出15μL,加入5μL的 4×SDS样品缓冲液,全部上样。

 

◆与传统沉淀法的功能比较实验

  分别用本试剂盒、超离心法和聚合物沉淀法从K562(人慢性骨髓性白血病)细胞培养上清(无血清培养上清或10%Exosome-depleted FBS添加培养基)提取外泌体,分别比较三种方法的外泌体回收量和外泌体纯度。

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS【PS亲和法】

按照试剂盒的操作说明(反应时间:3小时),从1mL经过离心处理(10,000×g,30min)的K562细胞培养上清(无血清培养基或10% Exosome-depleted FBS添加培养基※1)中提取外泌体。

超速离心法

将10mL经过离心处理(10,000×g,30min)的K562细胞培养上清(无血清培养基或10% Exosome-depleted FBS添加培养基※1)进行超离(110,000×g,70min),用TBS缓冲液重悬沉淀物后,再进行超离(110,000×g,70min),回收沉淀部分。

聚合物沉淀法

从1mL经过离心处理(10,000×g,30min)的K562细胞培养上清(无血清培养基或10% Exosome-depleted FBS添加培养基※1)中,按照市售的A公司产品的操作说明(静置时间:过夜)提取外泌体。

※1:110,000×g离心2小时,在不吸到沉淀的前提下回收上清。

 

比较提取的外泌体的透射电子显微镜(TEM)分析结果和纳米粒子追踪(NTA)分析结果

分别用本试剂盒、超离法、聚合物沉淀法提取外泌体,用NanoSight LM10检测外泌体片段的粒子直径。另外,用最终浓度为2%的多聚甲醛固定提取到的外泌体片段(2~4×1010 particles),在透射电子显微镜进行分析。

5.png

电子显微镜图像 数据提供:金泽大学 医学系 华山教授、大阪大学 iFReC 中井先生

MagCapture™可提取到很多100nm左右的粒子,在透射电子显微镜中也可以确认到很多细胞外囊泡。

 

K562细胞培养上清提取的外泌体回收量和纯度的比较(无血清培养基)

用PS亲和法、超离法和聚合物沉淀法从K562 细胞培养上清(无血清培养基)获得样品进行电泳。接着用银染色和WB法(CD63, Flotilin-2和Lamp-1抗体)进行实验。

 

6.jpg

6.5.jpg

回收量,不是回收率

● 检测抗体

抗CD63小鼠单抗(MEM-259)

抗Flotillin-2 小鼠单抗  (29/Flotillin-2),BD Bioscience公司

抗Lamp-1小鼠单抗 (25/Lamp-1),BD Bioscience公司

 

K562细胞培养上清提取外泌体的回收量和纯度的比较(10%FBS-添加培养基)

用MagCapture™外泌体提取试剂盒 、超离法和聚合物沉淀法,从K562 细胞培养上清(10% 去外泌体 FBS补充培养基)获得样品进行电泳,用银染法和WB法(CD63、Lamp-1和Flotilin-2抗体)进行实验。同时,对外泌体提取片段进行质谱测定,比较所有测定的多肽中来自K562细胞的人来源多肽的比例(由于添加到细胞培养基的FBS中牛蛋白聚集体是混杂的,所以人来源多肽的比率会下降)。

7.png

● 检测抗体

抗CD63小鼠单抗(MEM-259)

抗Flotillin-2小鼠单抗 (29/Flotillin-2),BD Bioscience公司

抗Lamp-1小鼠单抗(25/Lamp-1),BD Bioscience公司

健康人血清来源的外泌体中提取miRNA和mRNA的回收量比较

实验数据

①运用不同方法提取外泌体并比较从中提取的microRNA和mRNA的回收量

通过超离法和PS亲和法将EVs从正常人血清中分离,然后使用microRNA提取试剂盒(产品编号295-71701)提取RNA。通过qRT-PCR分析提取的RNA,并比较microRNA (let-7a, miR-16, miR-92a, miR-142-3p)、mRNA (GAPDH, PIK3CB)的Ct值。

8.png

相比超离法,PS亲和法提取所得EVs中的microRNA和mRNA得到更高产量。

②运用不同的RNA提取方法提取microRNA和mRNA的回收量比较

运用PS亲和法将EVs从正常人血清中分离,然后使用microRNA提取试剂盒(产品编号295-71701)或基于AGPC法的试剂提取RNA。通过qRT-PCR分析提取的RNA,并比较microRNA (let-7a, miR-16, miR-92a, miR-142-3p)、mRNA (GAPDH, PIK3CB)的Ct值。

9.png

对比AGPC法,使用microRNA提取试剂盒更能有效提取PS亲和法纯化所得EVs中的microRNA和mRNA

◆外泌体蛋白质组学分析

<实验内容及结果>

分别利用PS亲和法、超离法、聚合物沉淀法,从含10% FBS(不含外泌体)的K562细胞培养上清液中提取外泌体。将提取样品用10%聚丙烯酰胺电泳分离,剪切出全部的蛋白质条带。然后在凝胶内进行消化,用LC-MS对蛋白质进行检测。对上述三种方法提取的外泌体进行蛋白质组合的相关性比较。

比较通过MASS分析鉴定的前10个蛋白质

白色柱:源自外囊泡的人类蛋白质

灰色柱:来自FBS的牛蛋白污染物

红 色:来自外囊泡的标记蛋白

样品:K562细胞培养基(含有10%去除外泌体胎牛血清)

PS亲和法 超离法 聚合物沉淀法
1 71kDa热休克同源蛋白

(Heat shock cognate 71kDa protein)

DNA依赖蛋白激酶催化亚基基因

(DNA-dependent protein kinase catalytic subunit)

补体C3

(Complement C3)

2 膜联蛋白A6

(Annexin A6)

铁转蛋白受体1

(Transferrin receptor protein1)

α2-巨球蛋

(Alpha-2-macroglobulin)

3 铁转蛋白受体1

(Transferrin receptor protein1)

血清白蛋白

(Serum albumin)

纤连蛋白

(Fibronectin)

4 V-ATP酶A亚基

(V-type proton ATpase catalytic subunit A)

ATP依赖RNA解旋酶

(ATP-dependent RNA helicase A)

血清白蛋白

(Serum albumin)

5 浮舰蛋白-2

(Flotillin-2)

微管蛋白β5

(Tubulin beta-5 chain)

血小板反应蛋白-1

(Thrombospondin-1)

6 程序性细胞死亡6互作蛋白(Programmed cell death 6-interacting protein) 71kDa热休克同源蛋白

(Heat shock cognate 71kDa protein)

补体C4

(Complement C4)

7 细胞表面抗原4F2重链

(4F2 cell-surface antigen heavy chain )

脂肪酸合成酶

(Fatty acid synthase)

α-1抗蛋白酶

(Alpha-1-antiproteinase)

8 膜联蛋白A1

(Annexin A1)

细胞表面抗原4F2重链

(4F2 cell-surface antigen heavy chain)

载脂蛋白-β-100

(Apolipoprotein-β-100)

9 220kDa激酶D相互作用底物

(Kinase D-interacting substrate of 220kDa)

U5小核核糖核蛋白的解旋酶

(U5 small nuclear ribonucleoprotein helicase)

胎儿血红蛋白亚单位

(Hemoglobin fetal subunit beta)

10 膜联蛋白A2

(Annexin A2)

β4微管蛋白

(Tubulin beta-4B chain)

β5微管蛋白

(Tubulin beta-5 chain)

10.5.png

成对组合相关性比较

10.png

 

◆应用数据

11.png

Protein Assay BCA Kit检测外泌体的蛋白质浓度

Protein Assay BCA Kit是利用二辛可宁酸(BCA)定量检测溶液中的蛋白质浓度的试剂盒,是蛋白质定量检测法中最通用的方法。其原理为,碱性条件下的蛋白质Cu2+离子被还原为Cu+。Cu+与BCA形成络合物,即产生紫色螯合物,蛋白质浓度与紫色螯合物颜色深浅有关,通过测定562nm处的吸光度,并与标准曲线做比照,即可定量溶液中的蛋白质浓度。

利用MagCapture™外泌体提取试剂盒从细胞培养上清液中提取外泌体,通过Protein Assay BCA Kit高灵敏的检测外泌体中蛋白质浓度。

【实验内容及结果】

将通过MagCapture™外泌体提取试剂盒提取的25μL外泌体溶液分注于96孔板中,加入 Protein Assay BCA Kit中试剂A和试剂B混合液200μL。之后60℃孵育30分钟,检测560nm吸光度(图1)。结果表明,通过Protein Assay BCA Kit的高灵敏度检测,可测定提取后外泌体中蛋白质浓度。

12.png

图1. Protein Assay BCA Kit 检测BSA的检量线和提取的外泌体蛋白质浓度的检测

 

<BCA Assay 操作概要>

由于外泌体蛋白质浓度相当低,因此BCA测定时不要稀释样品。

①    将BSA标准溶液按照250、125、62.5、31.25、15.625μg/mL和空白对照,分别每孔25μL加到96孔板中。

②    分别把提取的外泌体和洗脱缓冲液(空白)按照每孔25μL加入96孔板。

③    把200μL Protein Assay BCA Kit(产品编号:297-73101)的试剂A盒试剂B混合液(A:B=50:1)加入放有样品的孔板中。

④    60℃孵育30分钟

⑤    室温条件下降低孔板温度

⑥    测定560nm的吸光度

产品编号 产品名称 包装
297-73101 Protein Assay BCA Kit

蛋白测定试剂盒(二喹啉甲酸)

250次用
015-25613 2 mg/mL Albumin Solution   from Bovine Serum

2mg/mL 牛血清蛋白溶液

1mL×10

 

◆外泌体的标记和Hela细胞导入实验

【实验概要】

用PKH67(Sigma公司)标记MagCapture™ 外泌体提取试剂盒提取的细胞外囊泡, Hela细胞导入确认

<外泌体PKH67标记>

1. MagCapture™ 外泌体提取试剂盒提取外泌体(实验当天从K562细胞培养上清液提取外泌体)

2. 用BCA Assay和NanoSight检测样品的蛋白质浓度和粒子浓度

3. 将相当于5μg*蛋白量的外泌体样品溶液分装至1.5mL管中。

*请配制合适的使用量

4. 将2.0μL的PKH linker溶解在0.25mL的DiluentC中。…4×Dye solution*

*请配制合适的使用量

5. 添加1/3样品量的4×Dye solution至样品中,混合后在室温中孵育5-10分钟。

6. 根据附带的操作说明用PBS平衡Exosome Spin Columns (MW 3000) (Thermo公司)。

7. 将100μL样品分别加入上述平衡后的旋转柱*中,离心(最大添加量:100μL)。

*准备必需的支数。

8. 将外泌体溶液*加入到已经接种好Hela细胞的培养皿中,24小时后用显微镜观察并利用流式细胞仪进行分析。

*根据实验调节外泌体添加量

13.png

图1. PKH标记外泌体的细胞捕获观察

从16mL K562培养上清液中超滤浓缩得到4mL培养上清液作为样品,通过PS亲和法提取外泌体。

●      提取的外泌体蛋白质浓度:22.3ng/μL

●      粒子浓度:1.2×108 particles/mL

将上述标记的外泌体溶液全部加入接种好的Hela细胞中,24小时后用荧光显微镜(左)和流式细胞仪(右)检测捕获情况。

Opti-MEM:取相同量用PKH标记后添加到细胞中作为阴性对照。

14.png

 

◆细胞培养上清•血清•血浆的预处理操作

样品预处理:对样品进行1,200×g离心操作※1。如果要得到更高纯度的外泌体,则按照下述步骤对样品进行10,000×g离心操作※2。

下文是细胞培养上清、血清/血浆的预处理方法。其他体液样品的预处理操作,请参考血清/血浆的实验步骤,做适当调整。

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更换缓冲液(限制过滤)操作

用50 mL TBS 缓冲液对1 mL 已经经过离心处理的EDTA 血浆样品进行缓冲液更换。

1. 把19 mL TBS 加进VivaSpin20(100K)中。

2. 把1 mL 离心过的EDTA 血浆上清添加在第1. 的VivaSpin20(100K)中,

混匀。

3. 把第2. 的VivaSpin20(100K)在4℃下进行离心处理。

4. 减少上线的液体后,在VivaSpin20(100K)中追加10 mL TBS 缓冲液。

5. 4℃下离心处理。

6. 减少上面的液体后,在VivaSpin20(100K)中追加10 mL TBS 缓冲液。

7. 4℃下离心处理。

8. 减少上面的液体后,在VivaSpin20(100K)中追加11 mL TBS 缓冲液。

9. 4℃下离心处理直至样品液量达到1 mL 以下。

10. 进行提取。

 

◆MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 操作步骤

16.png

 

更多应用说明,请点击:

新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用

外泌体与肿瘤细胞转移及恶化的关联

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PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

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PS Capture™ 外泌体流式试剂盒

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
293-77601 MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS
Exosome外泌体提取试剂盒PS
10次用
299-77603 MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS
Exosome外泌体提取试剂盒PS
2次用 for Genetic Research
016-27061 Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)
抗CD63单抗(3-13)
20uL
012-27063 Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13)
抗CD63单抗(3-13)
100uL
CAC-SHI-EXO-M02-50UL Anti CD63 for Exosome Isolation
CD63 外泌体提取抗体
50uL
CAC-SHI-EXO-M01-100UL Anti CD9 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD9
100uL
CAC-SHI-EXO-M02-100UL Anti CD63 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD63
100uL
CAC-SHI-EXO-M03-100UL Anti CD81 for Exosome Isolation
外泌体分离抗体CD81
100uL
CSR-SHI-EXO-K010 ExoTrap ™ Exosome Isolation Spin Column Kit, for Protein Research
外泌体分离亲和柱套装,蛋白研究用
kit
290-35591 Magnet Stand
MagCapture系列磁珠捕获用磁力架
1个

 

Wako L-012化学发光探针120-04891

Wako L-012化学发光探针120-04891

货号:120-04891

英文名:L-012

L-012 是一种高灵敏度的化学发光(CHL) 探针,比鲁米诺(Luminol)试剂更有效。L-012 与多种类型的活性氧反应,这些活性氧来自人血液和口腔中激活的中性粒细胞或者大鼠腹膜腔。该产品可以用于有辣根过氧化物酶的ELISA 试剂盒,可提高反应灵敏度。