PA tag
亲和纯化标签蛋白!
PA tag 系统是利用高亲和性&高特异性单抗(NE-1)识别肽标签(GVAMPGAEDDVV)的重组蛋白新型检测系统。PA tag 系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化 PA tag 融合蛋白,并可在洗涤后获得再生。中性 pH 条件下 PA tag 肽简单方便地竞争性洗脱 PA tag 融合蛋白。
PA tag 系统的亲和性和特异性优于现有标签系统,抗体琼脂糖可再生 60 次,极大地降低成本,可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术,是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。
◆原理
载体列表
产品名称(载体名称)
抗性
规格
产品编号
大肠杆菌抗性
真核细胞抗性
pCAG-Ble PA tag-C
Bleomycin
20 μg
161-26861
pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus
20 μg
168-26871
pCAG-Bsd PA tag-C
Blasticidin S
20 μg
165-26881
pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus
20 μg
162-26891
pCAG-Hyg PA tag-C
Hygromycin B
20 μg
165-26901
pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus
20 μg
162-26911
pCAG-Neo PA tag-C
Kanamycin
G418
20 μg
169-26921
pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus
20 μg
166-26931
◆优点、特色
案例、应用
【使用例子:PA 标签抗体,大鼠单克隆抗体(NZ-1)】
NZ-1 是特异性识别 PA tag(GVAMPGAEDDVV)的单克隆抗体,能用于检测动物细胞表达的 PA tag 融合蛋白,亲和性很高并能简单地用肽洗脱!已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。
浓度: 标签表示(约1.0 mg/mL)
配方: 1× PBS(pH 7.5)水溶液
克隆号: NZ-1
亚型: IgG2a
应用: 免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL
免疫沉淀 10 – 50 μg/assay
流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL
免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL
保存条件:2–10°C 避免反复冻融
【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】
标记抗PA tag抗体
PA tag-EGFP-6×His tag,重组,溶液
亲和标签比较
亲和标签 |
TARGET |
PA |
6 x His |
c-Mys |
HA |
GST |
序列 |
(YPGQ)5V |
GVAMPGAEDDVV |
HHHHHH |
EQKLISEEDL |
YPYDVPDYA |
– |
残基数 |
21 |
12 |
6 |
10 |
9 |
218 |
分子量(kDa) |
2.34 |
1.16 |
0.84 |
2.34 |
1.16 |
0.84 |
配位子 |
TARGET tag |
PA tag |
Ni, Co, Zn, Cu |
c-Myc tag |
HA tag |
GST |
抗体琼脂糖的 再利用 |
最高可再生循环利用40次 |
最高可再生循环利用60次 |
不可再生 |
不可再生 |
不可再生 |
不可再生 |
重组蛋白 纯化成本 |
+ |
+ |
+ |
++ |
++ |
+ |
单克隆抗体结合力(KD(M))(数字越小,亲和力越高) |
1.0×10-8 |
4.9×10-10 |
Ni-NTA: 1.0×10-5~6 |
2.2×10-9 |
2.8×10-9 |
Glutathione: 1.0×10-5~6 |
亲和性 |
++++ |
+++++ |
+++ |
++++ |
++++ |
++++ |
和动物细胞外(培养基)的蛋白非特异性结合 |
+ |
+ |
+++++ |
+++ |
+++ |
++++ |
和动物细胞内蛋白的非特异性结合 |
+ |
+ |
++++ |
++++ |
+++ |
++++ |
肽洗脱 |
+++ |
+++ |
咪唑洗脱 |
++ |
++ |
谷胱甘肽洗脱 |
本比较表由富士胶片和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化,不能保证各种亲和标签的性能。
Target tag 系统和 Pa tag 系统同属Wako亲和标签系统,详情请联系经销商。
Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”:http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/14.html
1. Fujii, Y. et al., “PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against a dodecapeptide
derived from human podoplanin.”, Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).
2. Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法~蛋白質の精製および検出~蛋白質科学会アーカイブ, 7,e075
(2014)
3. Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)