MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒

MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒

 

本试剂盒包含新型链霉亲和素样蛋白 Tamavidin® 2的突变体、可洗脱的生物素样 Tamavidin® 2-REV 的固定化磁珠以及FUJIFILM Wako的洗脱用缓冲液。

本品可应用于生物素化 RNA(bait RNA)的 RNA Pull Down,所拉下来的含有生物素化 RNA 的核糖核蛋白(RNP)复合物无需变性,即可通过生物素竞争性洗脱回收。

因此,与使用 SDS 等变性剂的洗脱法相比,本试剂盒优势为可减少目的蛋白中的非特异性蛋白。可有效应用于对于确定与目的 RNA 相互作用的蛋白以及功能未知的新型长链非编码 RNA(lncRNA)的功能分析。

Tamavidin® 2-REV~和生物素可逆结合功能


Takakura, Y. et al.: “Tamavidin® 2-REV : an engineered tamavidin with reversible biotin-binding capability.”, J. Biotechnol., 164(1), 19-25(2013).

Tamavidin® 2-REV 是新型链霉亲和素样蛋白 Tamavidin® 2的突变体。通过减低与生物素的亲和力,可以形成可逆性的生物素结合复合物。因此,通过添加过量的生物素可以竞争性洗脱生物素化分子

(传统的链霉亲和素(抗生物素蛋白)和生物素的结合力非常牢固,发生不可逆的结合。)

试剂盒内容    10次反应

RPD捕获磁珠——500 μL

RPD洗涤缓冲液——55 mL

RPD细胞裂解缓冲液——25 mL

RPD重组缓冲液——1500 μL

RPD生物素洗脱缓冲液——1000 μL

◆操作步骤概述

MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒

应用数据 ~以 HOTAIR RNA 进行 RNA Pull Down 分析~

※HOTAIR 是一种与肿瘤发生密切相关的 lncRNA

MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒

MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒

 

 

  银染

  bait RNA:生物素标记 HOTAIR RNA 正义链

  洗脱:Sample Buffer、4%SDS溶液、

  洗脱:试剂盒附带的生物素溶液

  样本:K562 细胞(1×107 细胞)的总细胞裂解液

 

  Western Blot

  一抗:抗 Ezh2 抗体

  二抗:抗兔 IgG(Fc)单抗,POD 结合

  二抗:(Code No. 016-23943)

  与传统产品相比,本试剂盒可获得低背景的 RNA 结合蛋白。

 

产品编号 产品名称 规格 包装
297-77501 MagCapture™ RNA Pull Down 检测试剂盒
MagCapture™ RNA Pull Down Assay Kit
基因研究用 10 次

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MagCapture™ Tamavidin® 2-REV
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MagCapture™ HP Tamavidin® 2-REV
2 mL
205-18263 Tamavidin® 2, recombinant
Tamavidin® 2, 重组型
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203-19401 Tamavidin® 2-REV, recombinant
Tamavidin® 2-可逆型, 重组型

与生物素可逆性结合

1 mg
209-19403 5 mg
205-19363 Tamavidin® 2-HOT, recombinant
Tamavidin® 2-耐热型, 重组型

超耐热、耐有机溶剂

5 mg

根据有关许可,Tamavidin® 是日本 Tabako 产业株式会社的注册商标。Tamavidin® 由日本 Tabako 产业株式会社授权给 FUJIFILM Wako 进行销售。

详细产品单页,请点击下载:MagCapture™ RNA Pull down kit