大鼠生长激素（GH） ELISA试剂盒
生长激素（Growth hormone，别名Somatotrop（h）ic hormone、 STH、 Somatotrop（h）in）主要是由垂体前叶嗜酸性腺垂体分泌的蛋白激素,在大脑和淋巴细胞表达。与GH高度相似的GH2表达于人的胎盘。GH作用于肝脏、肌肉、肾脏、软骨细胞、成纤维细胞、胸腺上皮细胞。在IGF-1作用下，通过软骨细胞的增殖、硫酸软骨素的合成、肝脏其他器官细胞肥大增殖、促蛋白合成等促进生长，对胸腺细胞分泌胸腺素起到促进作用。GH暂时性表达胰岛素样作用，之后在脂肪细胞中通过脂肪分解增加游离脂肪酸、血糖上升、胰岛素拮抗作用抑制糖分解、肌肉中糖原含量增加、末梢组织胰岛素灵敏性下降等代谢方面起到一定双相性作用。还起到类似催乳素作用对Na、K、Mg、Ca、P的存积、促进小肠Ca吸收、乳腺发育、乳汁分泌等作用。
GHRH、生长素释放肽、甲状腺激素、皮质醇、视黄酸均可促进GH合成分泌。另外通过胰高血糖素、加压素、2-脱氧-D-葡萄糖耐受性、精氨酸等酸负载、蛋白质摄入、TF5、β-内啡肽、左旋多巴、肾上腺素α受体刺激等可促进GH分泌。促进GH分泌的生理状态是低血糖、应激（发热，外伤，出血，乙醚麻醉，精神焦虑）、空腹、运动、慢波睡眠等。GH分泌会抑制引起促生长素抑制素（SRIF）、活化素、肾上腺素β受体刺激、葡萄糖、游离脂肪酸、皮质类固醇投放、高浓度IGF-1、高浓度GH等现象发生。抑制GH分泌的生理状态是高血糖、增加血液中的脂肪、异相睡眠等。GH分泌是具有episodic性的。也就是说可间隔性地使血糖浓度急剧上升或下降。因此非人为采血时血中GH水平会变化很大。
◆特点
● 测定时间短（总反应时间：5小时）
● 微量样本（标准操作法5 μL）即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
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组成品 |
状态 |
包装 |
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抗体包被96孔板 |
清洗后使用 |
96 wells（8×12）/1个 |
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标准溶液（20 ng/mL） |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
|
缓冲液 |
直接使用 |
60 mL/1瓶 |
|
生物素结合抗GH抗体 |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
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过氧化物酶·抗生素结合物 |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
|
显色液（TMB） |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
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终止液（1M H2SO4） ※小心轻放 |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
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浓缩清洗液（10×） |
稀释后使用 |
100 mL/1瓶 |
|
孔板密封膜 |
4个 |
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产品说明书 |
1本 |
物种交叉性
2000 pg/mL时数据＋：有交叉性 ―：无交叉性
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动物种类 |
对象物质 |
反应性及反应率（%） |
|
大鼠 |
r-GH |
100 |
|
Prolactin |
0.02 |
|
|
Placental lactogen |
0.02 |
|
|
TSH |
― |
|
|
LH |
― |
|
|
FSH |
― |
|
|
小鼠 |
GH |
＋ |
|
TSH |
― |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 5 μL/well（标准操作法）
※ 样本量可调节范围：5~25 μL。但需用缓冲液将板孔总量调制至50 μL
※ 推荐使用1 mg/mL （终浓度）EDTA作为抗凝剂。
◆测定范围
● 31.3～2,000 pg/mL（标准曲线范围）
● 62.6～4,000 pg/mL（样本量25 μL时）
● 0.313～20 ng/mL（标准操作时）
◆实验数据
精度测试（组内变异）
|
样本 |
A |
B |
|
1 |
262 |
864 |
|
2 |
247 |
837 |
|
3 |
250 |
813 |
|
4 |
258 |
775 |
|
5 |
251 |
780 |
|
6 |
257 |
800 |
|
7 |
254 |
771 |
|
8 |
270 |
779 |
|
Mean |
256 |
802 |
|
SD |
7.19 |
33.5 |
|
CV（%） |
2.8 |
4.2 |
单位：pg/mL
重复性测试（组间变异）
|
测定日/样本 |
E |
F |
G |
|
0天 |
1626 |
412 |
96.0 |
|
1天 |
1576 |
407 |
97.9 |
|
2天 |
1615 |
409 |
96.1 |
|
3天 |
1561 |
401 |
103 |
|
Mean |
1595 |
407 |
98.3 |
|
SD |
31.0 |
4.50 |
3.35 |
|
CV（%） |
1.9 |
1.1 |
3.4 |
单位：pg/mL，n=4
加标回收测试
样本C
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
101 |
— |
— |
|
155 |
265 |
164 |
106 |
|
192 |
285 |
184 |
95.8 |
|
223 |
325 |
224 |
100 |
单位：pg/mL，n=2
样本D
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
506 |
— |
— |
|
303 |
822 |
316 |
104 |
|
466 |
949 |
443 |
95.1 |
|
539 |
1058 |
552 |
102 |
单位：pg/mL，n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果，直线回归值R2=0.999。
参考文献
|
1. |
Daily Fasting Blood Glucose Rhythm in Male Mice: A Role of the Circadian Clock in the Liver. Ando H, Ushijima K, Shimba S, Fujimura A. Endocrinology. 2016 Feb;157(2):463-9. |
|
2. |
Casted-immobilization downregulates glucocorticoid receptor expression in rat slow-twitch soleus muscle. Sato S., Suzuki H., Tsujimoto H., Shirato K., Tachiyashiki K., Imaizumia K. Life Sciences, Vol.89(25-26), p962-967, Dec 2011. |
|
3. |
Activation of PPARδ promotes mitochondrial energy metabolism and decreases basal insulin secretion in palmitate-treated β-cells. Jiang L., Wan J., Ke L., LU Q., Tong N. Molecular and Cellular Biochemistry, Vol.343(1-2), p249-256, Oct 2010. |
|
4. |
The CXCR4 antagonist AMD3100 suppresses hypoxia-mediated growth hormone production in GH3 rat pituitary adenoma cells. Yoshida,D.,Koketshu,K.,Nomura,R.,Teramoto,A. J Neurooncol, 2010. |