LabAssay™ Cholestrol LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

LabAssay™ CholesterolLabAssay™ Cholestrol                              LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

血清中的胆固醇浓度与肝脏和肠道中的胆固醇生成、吸收、分解代谢及血液中的脂蛋白代谢密切相关。本产品为基于N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS)的蓝色显色酶法试剂。微孔板法可用于测定小鼠、人血清中的总胆固醇。

 

检测原理

显色试剂作用于样品后,样品中的胆固醇酯类被胆固醇酯酶分解为游离的胆固醇和脂肪酸。生成的胆固醇与原有的游离胆固醇共同被胆固醇氧化酶氧化,同时产生过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(HRP)的作用下,使得DAOS和4-氨基安替比林进行定量氧化缩合,生成蓝色色素。通过测定这种蓝色色素的吸光度,可计算出样品中总胆固醇的浓度。

 

◆试剂盒组成

1.缓冲液——150 mL×1瓶

2.显色剂——150 mL用×1瓶

3.标准液——5 mL×1瓶

 

◆试剂盒性能

● 标准曲线范围:50~592.2 mg/dL(mg/100 mL)

● 测定时间:约10 min

● 样品:血清、血浆(小鼠、大鼠、人)

● 所需样品量:2 μL

● 测定波长:主波长600 nm、副波长700 nm

 


◆标准曲线示例

LabAssay™ Cholestrol                              LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒                                              

 

◆检测操作方法

微孔板法

根据下表条件,在孔板内进行反应。


Tests

标准

空白

显色剂

300 μL

300 μL

300 μL

待测物

样品 2 μL

标准溶液 2 μL

充分混合,在37℃加热5min。以空白为对照,测定样品和标准溶液的吸光度。
    主波长600 nm/副波长700 nm

◆加标回收测试

胆固醇的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。

 

人样品

人样品

添加量(mg/dL)

测定值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

166.4

47.6

219.1

52.6

110.60%

99.7

276.2

109.7

110.00%

150.4

326.3

159.9

106.30%

201.3

378.3

211.9

105.20%

血浆样品(EDTA)

0

130.2

47.6

181

50.8

106.60%

99.7

237.8

107.6

107.90%

150.4

280.5

150.3

100.00%

201.3

343.2

213

105.80%

小鼠样品

小鼠样品

添加量(mg/dL)

测定值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

86.1

47.6

136.1

50

105.00%

99.7

188.6

102.5

102.80%

150.4

239.3

153.2

101.90%

201.3

288.1

202

100.30%

血浆样品(EDTA)

0

35.5

47.6

84.5

49.1

103.10%

99.7

134.4

98.9

99.20%

150.4

188.9

153.5

102.10%

201.3

230.6

195.1

96.90%

大鼠样品

大鼠样品

添加量(mg/dL)

测定值(mg/dL)

回收量(mg/dL)

回收率(%)

血清样品

0

69.9

47.6

121.5

51.6

108.30%

99.7

161.8

91.9

92.10%

150.4

220.8

150.8

100.30%

201.3

276.8

206.9

102.70%

血浆样品(EDTA)

0

42.6

47.6

91.8

49.2

103.30%

99.7

137.6

95

95.30%

150.4

180.1

137.5

91.50%

201.3

235.8

193.2

96.00%

◆样品检测示例

人血清样品

样品批次

测定值(mg/dL)

平均值(mg/dL)

SD

CV(%)

人血清

191.7

173.6

182.7

12.8

7

人血浆(EDTA)

143.2

143.1

143.2

0.02

0

混合人血清,男性

序号

平均值

SD

CV(%)

1

0.687

0.001

0.2

混合人K2EDTA血浆,男性

序号

平均值

SD

CV(%)

1

※0.352

0.003

0.8

大鼠血清(10%稀释)

序号

测定值(mg/dL)

平均值(mg/dL)

SD

CV(%)

1

60

67.1

63.6

5.03

7.9

2

84.6

89

86.8

3.12

3.6

3

90.7

80.8

85.8

7

8.2

4

82.1

72.3

77.2

6.88

8.9

5

89.3

93.9

91.6

3.24

3.5

大鼠血浆(EDTA)

序号

测定值(mg/dL)

平均值(mg/dL)

SD

CV(%)

1

42.9

38.6

40.8

3.03

7.4

2

59.3

54.3

56.8

3.56

6.3

3

51.1

46.3

48.7

3.38

6.9

4

45.2

40.2

42.7

3.58

8.4

5

59.2

63.7

61.5

3.15

5.1



20% 稀释健康大鼠血清, Sprague Dawley,雄性

序号

平均值

SD

CV(%)

1

※0.300

0

0

2

※0.371

0.004

1.1

3

※0.289

0.017

5.8

4

※0.365

0

0.1

5

※0.382

0.029

7.6

健康大鼠K2EDTA血浆,Sprague Dawley,雄性

序号

平均值

SD

CV(%)

1

※0.333

0.004

1.2

2

※0.356

0.003

0.8

3

※0.325

0.02

6

4

※0.218

0.005

2.6

5

0.515

0.01

1.9

小鼠血清(20%稀释)

序号

测定值(mg/dL)

平均值(mg/dL)

SD

CV(%)

1

95.4

89.3

92.4

4.31

4.7

2

85.3

84.5

84.9

0.58

0.7

3

68.6

71

69.8

1.71

2.5

4

80.9

73.6

77.3

5.22

6.8

5

64.8

66.8

65.8

1.45

2.2

小鼠血浆(EDTA)

序号

测定值(mg/dL)

平均值(mg/dL)

SD

CV(%)

1

41.2

39.1

40.1

1.51

3.8

2

43.7

40.8

42.2

2.01

4.8

3

35.8

38.7

37.2

2.08

5.6

4

43.1

41.4

42.2

1.23

2.9

5

39.3

40.7

40

0.99

2.5


20% 稀释健康小鼠血清,CD-1(ICR),雄性

序号

平均值(mEq/L)

SD

CV(%)

1

1.118

0.001

0.1

2

0.788

0.007

0.9

3

0.715

0.022

3.1

4

0.794

0.002

0.2

5

0.829

0.005

0.6

健康小鼠血浆K2EDTA, CD-1(ICR),雄性

序号

平均值

SD

CV(%)

1

※0.309

0.002

0.6

2

※0.320

0.002

0.6

3

※0.205

0.004

2

4

※0.179

0.008

4.6

5

※0.305

0.017

5.6

健康比格犬EDTA血浆,雄性

序号

平均值(mEq/L)

SD

CV(%)

年龄

1

0.442

0.0033

0.7

4

2

0.427

0.011

2.6

6

3

※0.308

0.0037

1.2

10

4

0.478

0.0123

2.6

12

5

0.473

0.005

1

6

6

※0.367

0.0047

1.2

11

7

0.78

0.0133

1.7

10

8

0.411

0.0387

9.4

12

健康比格犬血清,雄性

序号

平均值(mEq/L)

SD

CV(%)

年龄

1

0.656

0.0027

0.4

4

2

0.665

0.032

4.8

6

3

0.425

0.009

2

6

4

※0.38

0.0057

1.5

11

5

0.882

0.007

0.8

12

6

0.599

0.006

1.1

6

7

1.006

0.0267

2.7

10

8

0.506

0.006

1.2

4

健康短毛猫EDTA血浆,雄性

序号

平均值(mEq/L)

SD

CV(%)

年龄

1

1.099

0.0103

0.9

0.5

2

※0.174

0.0033

2

1

3

※0.241

0.0043

1.7

3

4

※0.320

0.0067

2.2

0.5

5

※0.359

0.006

1.7

3

6

※0.197

0.012

6.2

3

7

※0.215

0.024

11.1

0.5

8

※0.131

0.016

12.3

1

健康短毛猫血清,雄性

序号

平均值(mEq/L)

SD

CV(%)

年龄

1

0.717

0.0117

1.6

3

2

0.635

0.01

1.6

3

3

1.004

0.0053

0.5

6

4

0.981

0.0093

0.9

4

5

0.636

0.017

2.7

6

6

1.193

0.0267

2.3

6

7

1.022

0.0893

8.8

1

8

※0.382

0.0157

4.1

1

◆稀释线性度测试

LabAssay™ Cholestrol                              LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

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※ 产品已更新,旧编号为:294-65801

参考文献

1.

Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online (2015). Effects of Morus alba L. (Mulberry) Leaf Extract in Hypercholesterolemic Mice on Suppression of Cholesterol Synthesis  ※小鼠肝脏提取物

2.

Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291(2015). Effect of Keishibukuryogan on Genetic and Dietary Obesity Models ※大鼠肝组织提取物

3.

Yoshioka, H. and Onosaka, S. : Fundam. Toxicol. Sci., 3, 151(2016). Zinc sulfate pretreatment prevents carbon tetrachloride-induced lethal toxicity through metallothionein-mediated suppression of lipid peroxidation in mice ※小鼠血浆

4.

Fujii, N. et al. : Aging Cell16, 508 (2017). Sterol regulatory element-binding protein-1c orchestrates metabolic remodeling of white adipose tissue by caloric restriction※大鼠血浆

5.

Ushio, M. et al. : Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 305, E293 (2013). Ezetimibe prevents hepatic steatosis induced by a high-fat but not a high-fructose diet ※小鼠组织提取物

6.

Kobayashi, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 74, 2385 (2010). Ameliorative Effects of Mulberry (Morus alba L.) Leaves on Hyperlipidemia in Rats Fed a High-Fat Diet: Induction of Fatty Acid Oxidation, Inhibition of Lipogenesis, and Suppression of Oxidative Stress ※大鼠组织提取物