LBIS® Rat Insulin ELISA KIT(RTU)
LBIS® 大鼠胰岛素 ELISA试剂盒(RTU)
胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞分泌,分子量约 5800,等电点在 5.4 左右的一种蛋白质激素。
A6-A11、A7-B7、A20-B-19 之间形成二硫键,在酸性溶液或者不含 Zn 离子的中性水溶液中形成二聚体,在含锌离子的中性溶液中,则形成含2个 Zn 离子的六聚体。
肝脏、肌肉、脂肪组织是主要的靶组织,分别有以下的作用。
肝脏:促进糖原、蛋白质、脂肪酸合成、促进糖类的摄取和利用、抑制糖异生。
肌肉:糖类、氨基酸、K细胞膜通透性增大、促进糖原、蛋白质的合成、抑制蛋白质分解。
脂肪组织:葡萄糖细胞膜通透性增大、促进脂肪酸的合成。
胰岛素是细胞内的合成单链胰岛素原后通过二硫键结合一起形成的。在酶分解作用下被激活,C肽和胰岛素分离。
◆特点
• 测量范围广(100~12,000 pg/mL)
• 短时间测定(总的反应时间:两小时五十分钟)
• 微量样品(标准操作:10 μL)可测
• 使用对环境无害的防腐剂
• 全部试剂均为液体,可直接使用
• 精密的测定精度和高再现性
• 有效期限为 12 个月
◆构成
组成 |
状态 |
容量 |
(A)抗体固相化 96 孔板 |
洗净后使用 |
96 wells(8×12)/1 块 |
(B) 胰岛素标准液(大鼠) ①12,000 ②4,800 ③2,000 ④800 ⑤300 ⑥100(pg/ml) |
稀释后使用 |
各100 μL/1 瓶 |
(C) 缓冲液 |
即用 |
60 mL/1 瓶 |
(D) 生物素结合抗胰岛素抗体 |
稀释后使用 |
12 μL/1 瓶 |
(E) 过氧化物・抗生物素蛋白结合物 |
稀释后使用 |
12 μL/1 瓶 |
(F) 显色液(TMB) |
即用 |
12 mL/1 瓶 |
(H) 反应终止液(1M H2SO4)※小心轻放 |
即用 |
12 mL/1 瓶 |
( I ) 浓缩洗净液(10×) |
稀释后使用 |
100 mL/1 瓶 |
封板膜 |
3 张 |
|
使用说明书 |
1 份 |
◆样品信息
大鼠的血清•血浆•培养液
10 μL/well(标准操作)
※血浆采血建议使用肝素处理血液
◆测量范围
100~12,000 pg/mL(标准曲线范围)
◆Validation data
精度测试(组内变异)
样品 |
A |
B |
C |
1 |
798 |
1233 |
2520 |
2 |
782 |
1309 |
2601 |
3 |
783 |
1298 |
2611 |
4 |
779 |
1234 |
2598 |
5 |
788 |
1255 |
2623 |
6 |
799 |
1264 |
2642 |
mean |
788 |
1266 |
2599 |
SD |
8.52 |
32.0 |
42.0 |
CV(%) |
1.1 |
2.5 |
1.6 |
单位:pg/mL
重复性测试(组间变异)
测量日/样品 |
D |
E |
F |
第0天 |
516 |
1034 |
2007 |
第1日 |
514 |
1021 |
2031 |
第2日 |
510 |
1037 |
2038 |
第3日 |
528 |
1042 |
2028 |
mean |
517 |
1034 |
2026 |
SD |
7.58 |
8.9 |
13.3 |
CV(%) |
1.5 |
0.86 |
0.66 |
单位:pg/mL n=3
加标回收测试
样品G
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率(%) |
0.00 |
514 |
– |
– |
150 |
657 |
143 |
95.3 |
300 |
803 |
289 |
96.3 |
600 |
1113 |
599 |
99.8 |
1200 |
1729 |
1215 |
101 |
单位:pg/mL n=3
样品H
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率(%) |
0.00 |
1223 |
– |
– |
500 |
1721 |
498 |
99.6 |
1500 |
2764 |
1541 |
103 |
3000 |
4161 |
2938 |
97.9 |
4500 |
5620 |
4397 |
97.7 |
单位:pg/mL n=3
稀释直线性测试
用稀释缓冲液分4次连续稀释2个血清样品的测量结果,直线回归方程的 R2 在 0.998~0.999 之间。
相关资料
ELISA试剂盒选择指南①② |
ELISA试剂盒选择指③④ |