LBIS® Insulin-Rat (H type)
LBIS® 大鼠胰岛素 ELISA 试剂盒（H 型）
胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞分泌，分子量约 5800，等电点在 5.4 左右的一种蛋白质激素。
A6-A11、A7-B7、A20-B-19 之间形成二硫键，在酸性溶液或者不含Zn离子的中性水溶液中形成二聚体，在含锌离子的中性溶液中，则形成含２个 Zn 离子的六聚体。
肝脏、肌肉、脂肪组织是主要的靶组织，分别有以下的作用。
肝脏：促进糖原、蛋白质、脂肪酸合成、促进糖类的摄取和利用、抑制糖异生。
肌肉：糖类、氨基酸、Ｋ细胞膜通透性增大、促进糖原、蛋白质的合成、抑制蛋白质分解。
脂肪组织：葡萄糖细胞膜通透性增大、促进脂肪酸的合成。
胰岛素是细胞内的合成单链胰岛素原通过二硫键结合一起形成的。在酶分解作用下被激活，Ｃ肽和胰岛素分离。
◆特点
● 有色缓冲液（蓝色）、容易确认分装后的孔
● 短时间测定（总的反应时间：３小时）
● 微量样品（标准操作：10 μL）可测
● 使用对环境无害的防腐剂
● 全部试剂均为液体，可直接使用
● 精密的测定精度和高再现性
● 操作简便，不需要特别的预处理
◆构成
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组成 |
状态 |
容量 |
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(A) 抗体固相化 96 孔板 |
洗净后使用 |
96 wells（8×12）/1 块 |
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(B) 胰岛素标准溶液（大鼠）（200 ng/mL） |
稀释后使用 |
300 μL/1 瓶 |
|
(C) 缓冲液（蓝色） |
即用 |
60 mL/1 瓶 |
|
(D) 生物素结合抗胰岛素抗体 |
稀释后使用 |
200 μL/1 瓶 |
|
(E) 过氧化物・抗生物素蛋白结合物 |
稀释后使用 |
200 μL/1 瓶 |
|
(F) 显色液（TMB） |
即用 |
12 mL/1 瓶 |
|
(H) 反应终止液（1M H2SO4）※小心轻放 |
即用 |
12 mL/1 瓶 |
|
( I ) 浓缩洗净液（10×） |
稀释后使用 |
100 mL/1 瓶 |
|
封板膜 |
3 张 |
|
|
使用说明书 |
1 份 |
◆样品信息
大鼠的血清•血浆•培养液
10 μL/well（标准操作）
※血浆采血建议使用肝素处理血液
◆测量范围
0.5～100 ng/mL（标准曲线范围）
◆Validation data
精度测试（组内变异）
|
样品 |
A |
B |
C |
|
1 |
2.73 |
12.9 |
86.7 |
|
2 |
2.78 |
12.6 |
86.2 |
|
3 |
2.78 |
12.8 |
85.6 |
|
4 |
2.78 |
12.6 |
85.2 |
|
5 |
2.73 |
12.6 |
85.9 |
|
mean |
2.76 |
12.7 |
85.9 |
|
SD |
0.025 |
0.147 |
0.575 |
|
CV(%) |
0.9 |
1.2 |
0.7 |
单位：ng/mL
重复性测试（组间变异）
|
测量日/样品 |
D |
E |
F |
|
第０天 |
3.34 |
25.5 |
70.3 |
|
第１天 |
3.28 |
25.7 |
70.3 |
|
第２天 |
3.15 |
25.2 |
71.6 |
|
mean |
3.26 |
25.5 |
70.7 |
|
SD |
0.097 |
0.280 |
0.765 |
|
CV(%) |
3.0 |
1.1 |
1.1 |
单位：ng/mL n=2
加标回收测试
样品G
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率(%) |
|
0.00 |
31.3 |
– |
– |
|
20.0 |
51.2 |
19.9 |
99.5 |
|
40.0 |
73.1 |
41.8 |
105 |
|
60.0 |
94.3 |
63.0 |
105 |
单位：ng/mL n=2
样品H
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率(%) |
|
0.00 |
1.36 |
– |
– |
|
1.21 |
2.58 |
1.22 |
101 |
|
2.46 |
3.75 |
2.39 |
97.2 |
|
3.46 |
4.64 |
3.28 |
94.8 |
单位：ng/mL n=2
稀释直线性测试
用稀释缓冲液分3次连续稀释2个血清样品的测量结果，直线回归方程的R2在0.9966~0.9995之间。
相关资料
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| 说明书 |
ELISA试剂盒选择指南①② |
ELISA试剂盒选择指③④ |
参考文献
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1. |
Duodenal-jejunal bypass improves diabetes and liver steatosis via enhanced glucagon-like peptide-1 elicited by bile acids. Kashihara H, Shimada M, Kurita N, Sato H, Yoshikawa K, Higashijima J, Chikakiyo M, Nishi M, Takasu C. J Gastroenterol Hepatol. Vol.30(2), p308-15, Feb 2015. |
|
2. |
Improving Effects of Narazuke Lees on Fatty Liver of Rats Induced by High-Fat and High-Cholesterol Diets. Nakasa T, Yamagami S, Tanaka T, Tanaka H, Hariu H, Okinaka O. Food Science and Technology Research, Vol.20 (2014), No. 4, p849-857. |
|
3. |
Duodenal-jejunal bypass improves diabetes and liver steatosis via enhanced glucagon-like peptide-1 elicited by bile acids. Kashihara H, Shimada M, Kurita N, Sato H, Yoshikawa K, Higashijima J, Chikakiyo M, Nishi M, Takasu C. J Gastroenterol Hepatol. Aug 2014. |
|
4. |
Effect of diets with different fat contents on the development of diabetes in female Zucker diabetic fatty rat with leptin mutation. Kohlerova, Renata; Sznapkova, Martina; Slavkovsky, Rastislav; Jiroutova, Alena. Acta Veterinaria Brno, Vol.82(3), p289-296, 2013. |
|
5. |
Regulation of oxidative stress and inflammation by hepatic adiponectin receptor 2 in an animal model of nonalcoholic steatohepatitis. Matsunami,T.,Sato,Y.,Ariga,S.,Sato,T.,Kashimura,H.,Hasegawa,Y.,Yukawa, M. Int J Clin Exp Pathol. Vol.3(5), p472-481, 2010. |