MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 298-80601

提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2

本试剂盒是提取/纯化外泌体的试剂盒,比起第一代产品(293-77601 MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS),提高了外泌体的回收率和纯度,并缩短了实验操作的时间。使用本试剂盒纯化的外泌体可以直接用于细胞摄取实验。

◆特点

● 提高了外泌体的回收率和纯度

● 缩短亲和反应的时间(3 h→1 h)

● 降低纯化外泌体的细胞毒性

◆数据

 

■  比较外泌体的回收率

 

纳米级粒子数检测

ELISA EV表面标记物的比较 

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

 

 

Western blotting EV标记的比较

 

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

 

在间充质干细胞(MSC)的培养上清中,使用第一代产品(图中简写为Ver.1)和本试剂盒(图中简写为Ver.2)提取和纯化含外泌体的细胞外囊泡(图中简写为EV)。然后,对所得样品进行纳米级粒子数检测以及使用PS MagCapture™ 外泌体 ELISA Kit(链霉亲和素HRP)(产品编号:298-80601)和WB比较EV标记物。

Ver.2与Ver.1相比,回收率有所提高。

 

 

■ 比较纯化外泌体的细胞毒性

 

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

 

使用Ver.1和Ver.2提取和纯化COLO201细胞培养上清中含外泌体的细胞外囊泡。然后仅将elution buffer或纯化外泌体加入到人正常成纤维细胞中,观察经过48 h后的细胞形态变化。

在Ver.1中,加入外泌体和elution buffer后48 h出现了细胞死亡,而Ver.2中未观察到明显的细胞毒性。证明Ver.2中elution buffer的细胞毒性已经降低了。

 

 

■ 比较不同亲和反应时间里外泌体纯化的回收率

 

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

 

在COLO201细胞培养上清中,为Ver.2设定4个亲和反应时间条件,提取和纯化含外泌体的细胞外囊泡(EV)。然后,获得的样品使用PS MagCapture™ 外泌体 ELISA 试剂盒(链霉亲和素HRP)(产品编号:298-80601)比较EV表面标记物。

在Ver.2中,确认了1 h的亲和反应可以充分提取到培养上清中的细胞外囊泡。

 

 

点击此处查看相关视频:MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2

 

相关资料

 

MagCapture™ 外泌体提取试剂盒 PS Ver.2 提高回收率和纯化纯度的外泌体提取/纯化试剂盒

MagCapture™外泌体提取试剂盒PS Ver. 2 中英文说明书

◆友情链接

 

延伸阅读:Thermo Fisher发布——六种血清外泌体分离方法的蛋白质组学比较研究    文章

 

参考文献

 

1

W. Nakai, et al, Sci Rep 6, 33935 (2016). A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles. 全文【PMID:27659060】

来源细胞

  K562细胞・pMac

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  共聚焦显微镜/流式细胞术/WB/

  蛋白质组学分析/电镜观察/ELISA/FACS

使用特异地结合在EV表面显示的磷酸酯的Tim4蛋白质,开发了纯化EV的新方法。Tim4蛋白也可以作为量化ELISA和流式细胞术设施的EV的强大工具来使用,Tim4对EV的亲和力高。

2

A. Kraft, W81 Award. Regulating Cancer-Associated Fibroblast Biology in Prostate Cancer (2017) 全文

来源细胞

  BHPrS1细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB/nanoLC-MS-SWATH

蛋白激酶能通过诱导正常的前列腺间质纤维芽细胞产生促进前列腺癌间质细胞生长的蛋白质,可借此模仿肌纤维芽细胞关连的纤维芽细胞那样的表现型已得到证实。同时也暗示,可以从癌症患者的尿中检测到由筋纤维芽细胞分泌的蛋白质的变化。本研究获得的知见被认为是进一步开发反映间质蛋白质产生的新生化标记物不可或缺的。

3

S. Osawa et al, Biochem. Biophys. Res. Commun., 232-238 (2017). Fibronectin on   extracellular vesicles from microvascular endothelial cells is involved in   the vesicle uptake into oligodendrocyte precursor cells. 全文【PMID:28499870】

来源细胞

  脑微血管内皮细胞培养上清

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  MS/ELISA/存活、增殖率分析/流式细胞术

研究了脑微血管内皮细胞由来EV对少突胶质前体细胞的存活和增殖的影响。为了今后开发针对脑白质梗塞的治疗方法,有必要阐明神经细胞吸收EV的详细机制。

4

S. Nagashima et al,  , J. Virol., 91(22) e00822-17 (2017). Characterization of the Quasi-Enveloped Hepatitis E Virus Particles Released by the Cellular Exosomal Pathway 全文【PMID:28878075】

来源细胞

  HEV感染的人肝癌细胞培养上清

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB/基因测序/电镜观察(胶体金标记)/免疫染色

HEV粒子的衣壳被类似于外泌体的脂质膜一一覆盖,通过外泌体路径从感染细胞中释放出来。本文的研究可能有助于阐明今后的外泌体与准包膜HEV粒子之间的关系。

5

T. Yoshida et al, Curr. Protoc. Cell Biol., 11;777:3.45.1-3.45.18 (2017). High Purity Isolation and Sensitive Quantification of Extracellular Vesicles Using Affinity to TIM4 全文【PMID:29227551】

来源细胞

  ——

产品

  TIM4-Fc protein
PS Capture Exosome ELISA Kit

实验应用

  WB/电镜观察

通过使用能够以特定的钙依赖性方法与磷酸酯结合的TIM4来分离EV的基于亲和性的方法,使高纯度EV的分离和EV的高灵敏度的量化成为可能,期待其进一步加速基于以往研究方法的EV研究。

6

S. Saito et al,  Sci Rep 8, 3997  (2018). Glycome analysis of extracellular vesicles derived from human induced pluripotent stem cells using lectin microarray. 全文【PMID:29507392】

来源细胞

  人纤维芽细胞、人脂肪间充质干细胞的芽球、

  人软骨细胞、人iPS细胞培养上清

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB/凝集素芯片/流式细胞术/ELISA

使用高密度的凝集素芯片分析从人类多功能干细胞中产生的EV的糖组。EV上的糖组有望成为对的再生医疗中使用的干细胞识别和

7

H. Kobayashi et al, Nagoya J Med Sci., 80(2), 141-153 (2018).  Effects of exosomes derived from the induced pluripotent stem cells on skin wound healing. 全文【PMID:29915432】

来源细胞

  iPS细胞(201B7)培养上清

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  共聚焦显微镜/流式细胞术/WB/蛋白质组学分析/

  电镜观察/ELISA/FACS

研究了iPS细胞产生的外泌体对皮肤创伤的治愈的影响。来自iPS细胞的外泌体显展现了促进纤维芽细胞游走的可能性。这个结果暗示着在糖尿病性溃疡的治疗中可以使用来自iPS细胞的外泌体的可能性。

8

Y. Obata, et al., JCI Insight 3(8), 99680, (2018) Adiponectin/T-cadherin system enhances exosome biogenesis and decreases cellular ceramides by exosomal release. 全文【PMID:29669945】

来源细胞

  小鼠血管内皮F2细胞/人肝癌细胞系(HepG2)、

  人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)、

  小鼠横纹肌细胞(C2C12)

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB/NTA/免疫染色/电镜观察

确立了在外泌体合成中的脂联素/T-钙粘连蛋白系统的新作用。得到了通过外泌体的生化合成与分泌介导的借助脂联素/T-钙粘连蛋白所实现的脏器保护的新观点。

9

RC. Middleton, et al., J Extracell Vesicles 7(1) 1456888 (2018).  Newt cells secrete extracellular vesicles with therapeutic bioactivity in mammalian cardiomyocytes. 全文【PMID:29696078】

来源细胞

  蝾螈肢外植细胞(A1细胞)

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  qPCR/Nanosight纳米颗粒分析/

  WB/FACS/单粒子分析/蛋白质组学分析/

  NGS

使用蝾螈肢外植细胞(A1细胞)调整的培养基保护了哺乳动物的心肌细胞免受氧化应激反应引起的细胞凋亡。A1-EV中包含了能对核受体、膜配体、转录因子进行编码的多个mRNA,展现了对哺乳动物的心肌细胞有细胞保护效果。。

10

H. Kawahara, et al., Biol. Pharm. Bull. 41, 1119–1125 (2018). The Role of Exosomes/Extracellular Vesicles in Neural Signal Transduction.全文【PMID:30068858】

来源细胞

  ——

产品

  ——

实验应用

  ——

以通过EV为媒介的神经细胞和胶质细胞之间的信号传递为中心的神经生理学和神经障碍间关系的概论

11

M. Santiana, et al., Cell Host & Microbe 24, 208–220 (2018). Vesicle-Cloaked Virus Clusters Are Optimal Units for Inter-organismal Viral Transmission. 全文【PMID:30092198】

来源细胞

  H69人胆管细胞/MA104/

  (受轮状病毒、诺如病毒感染)

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB/电镜观察/ELISA

轮状病毒和诺如病毒以小胞内的病毒簇的形式被释放到粪便中,包含这个的小胞在粪便感染中不会受到损伤。小胞有很高的MOI,会引发重度疾病。被小胞覆盖的病毒集群比游离病毒粒子毒性更强,强调了以小胞与病毒簇为目标的抗病毒药物的必要性。

12

Antes, T. J, et al., Journal of nanobiotechnology, 16(1), 61(2018). Targeting extracellular vesicles to injured tissue using membrane cloaking and surface   display. 全文【PMID:30165851】

来源细胞

  CDC细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  Nanosight纳米颗粒分析/qPCR/

  in vivo効果分析

说明被称为“克隆”的EV膜锚定平台。
EV靶向定位可以通过克隆和表面表示两者来强化,通过尝试实行以不同细胞和组织为目标的数个不同EV表面改性的克隆来支持作为平台技术的克隆概念。

13

Kimura, H, et al., Clinical cancer research : an official journal of the American Association for Cancer Research, 25(6), 1936–1947(2019). CKAP4, a DKK1   Receptor, Is a Biomarker in Exosomes Derived from Pancreatic Cancer and a   Molecular Target for Therapy. 全文【PMID:30610103】

来源细胞

  PDAC细胞

产品

  PS Capture Exosome ELISA Kit

实验应用

  ELISA

对生存率低的胰腺导管腺癌(PDAC)需要寻找新的分子靶向疗法和伴随诊断,因此研究了细胞骨架相关蛋白质4(CKAP4)、新Dickkopf1(DKK1)受体是否能成为其候补。结果表明,外泌体分泌的CKAP   4可以成为PDAC的生物标记,抗CKAP 4mAbs可以有助于开发新的诊断方法和治疗方法。

14

Gorji-Bahri, Gilar, et al., Current gene therapy,18(6),336-350(2018). ExomiRs: A Novel Strategy in Cancer Diagnosis and Therapy. 全文【PMID:30332956】

来源细胞

  ——

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  ——

・对外泌体的生化合成和动作,以及它们的分离、特性评价和内容的说明
・关于exomiR在促进癌症方面的作用的最近的进展,以及关于exomiR作为癌症的生物标记和靶向治疗目标的应用

15

Xu, H, et al., Analytical chemistry, 90(22), 13451–13458(2018). Magnetic-Based Microfluidic Device for On-Chip Isolation and Detection of Tumor-Derived Exosomes.  全文【PMID:30234974】

来源细胞

  HepG2

产品

为了调整Tim4偶联磁珠,使用了magnetic   beads coated with streptavidin biotinylated mouse  Tim4-Fc

实验应用

  ELISA/WB

我们提出了集血清外泌体的芯片上分离和原位(in   situ)电化学分析为一体的2阶段微流体平台(ExoPCD芯片)。已经表明,ExoPCD芯片可作为全面的外泌体分析工具和潜在的非侵入性诊断平台。

16

Kuroda, H, et al., Molecular pharmaceutics, 16(1), 292–304(2019). Cluster of Differentiation 46 Is the Major Receptor in Human Blood-Brain Barrier   Endothelial Cells for Uptake of Exosomes Derived from Brain-Metastatic   Melanoma Cells (SK-Mel-28). 全文【PMID:30452273】

来源细胞

  SK-Mel-28・hCMEC/D3

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  LC-MS/MS /   Nanosight纳米颗粒分析/

  共焦距显微镜/qRT-PCR/基因测序

确定了脑转移癌细胞株(SKMel-28)由来的外泌体内化于人血脑屏障内皮细胞(hCMEC/D3细胞)中所涉及的受体。暗示了CD46是人血脑屏障内皮细胞(hCMEC/D3细胞)对SK-MIL-28由来外泌体吸收的主要受体。

17

Jin, J, et al., Stem cell research & therapy, 10(1), 95(2019). Exosome   secreted from adipose-derived stem cells attenuates diabetic nephropathy by promoting autophagy flux and inhibiting apoptosis in podocyte. 全文【PMID:30452273】

来源细胞

  脂肪由来干细胞(ADSC)・MPC5

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  电镜观察/ NTA/免疫沉淀/流式细胞术/

  CCK8分析/RT-PCR/WB

调查了糖尿病肾病(DN)中脂肪干细胞(ADSC)由来的外泌体的治疗作用和分子机制。ADSCs-Exo通过增强miR-486的表达改善了DN的症状,具有对足细胞的Smad1/mTOR信号传输路径的阻碍作用。由此ADSCs-Exo有可能成为将来DN的主要治疗战略。

18

Liu, Z, et al., Cell death discovery, 5, 79(2019). Exosomes from adipose-derived   mesenchymal stem cells prevent cardiomyocyte apoptosis induced by oxidative stress. 全文【PMID:30911413】

来源细胞

  ADSCs・MCM

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  流式细胞术/电镜观察/WB

明确了ADSC外泌体的性质,以其对缺血再灌注损伤所具有的心脏保护作用评价为目的。ADSC外泌体被用于对暴露在氧化压力下心肌细胞的心脏保护效果的体外调查。确认了不仅仅是来自ADSC的外泌体,各种各样的干细胞由来的外泌体均能在氧化压力下保护心肌细胞。

19

Patel, G. K, et al,. Scientific reports, 9(1), 5335(2019). Comparative analysis of exosome isolation methods using culture supernatant for optimum yield, purity and downstream applications. 全文【PMID:30926864】

来源细胞

  MiaPaCa cell(荧光素转染人胰腺癌细胞)

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  ζ-电位测定/WB/qRT-PCR

比较了Invitrogen、101Bio、Wako、iZON这四个试剂盒的有效性并与常规的超离心分离法的外泌体回收率、纯度和质量进行了比较。所有提取方法皆有长有短的,需要根据外泌体的使用目的来选择方法。在MagCapture以外的试剂盒中,均没有考虑到非外泌体的中等大小的小泡也会一并被分离。参照下表。

20

Tai, Y. L, et al., C26, Journal of biomedical science, 26(1), 35(2019). Basics and applications of tumor-derived extracellular vesicles. 全文【PMID:31078138】

来源细胞

  ——

产品

  ——

实验应用

  ——

关于肿瘤形成过程中肿瘤EV及其潜在临床应用的综述

21

Sugihara, Y, et al., PloS one, 14(5), e0217394(2019). Carnosine induces intestinal cells to secrete exosomes that activate neuronal cells.  全文【PMID:31136600】

来源细胞

  Caco-2・SH-SY5Y

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS,
PS Capture Exosome ELISA Kit

实验应用

  ELISA/微阵列分析

我们将肠上皮细胞中提取的外泌体是活化脑肠间相互作用的调控者考虑,并且还明确了由肌肽介导的脑内相互作用活性化与外泌体的关联。期待在未来的研究中,能进一步解明含功能性外泌体的食物引起的各种细胞间/组织间相互作用。

22

Liu, C. Y, et al., CNS neuroscience & therapeutics, 26(2), 189–196(2020).  Effect of exosomes from adipose-derived stem cells on the apoptosis of Schwann cells in peripheral nerve injury. 全文【PMID:31278850】

来源细胞

  ADSCs

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  共培养/WB/纳米颗粒分析/CCK8/流式细胞术

虽然尚没有最佳的末梢神经损伤(PNI)的治疗方法,但是已经明确了Schwann施万细胞(SC)对末梢神经的再生很重要,以SC为靶向的治疗正日益受到重视。从ADSC外泌体改善了SC的增生率这一结果,暗示着ADSC和SC之间的外泌体介导机制将来可能用于治疗。

23

Ando, W, et al., Scientific reports, 9(1), 13595(2019). Novel breast cancer screening: combined expression of miR-21 and MMP-1 in urinary exosomes detects 95% of breast cancer without metastasis. 全文【PMID:31537868】

来源细胞

  尿液外泌体

产品

  PS Capture Exosome ELISA Kit

实验应用

  ELISA/WB/电镜观察

为了研究能用于筛查的标记物,从乳腺癌(BC)患者及健康女性患者中收集尿样,调查了尿液外泌体中的miR-21及MMP-1/CD63。研究结果表明,miR-21和MMP/CD63可能是BC筛查中可靠的标记物。

24

Lou, G, et al., Journal of experimental & clinical cancer research : CR, 39(1), 4(2020). MiR-199a-modified exosomes from adipose tissue-derived mesenchymal stem cells improve hepatocellular carcinoma chemosensitivity through mTOR pathway. 全文【PMID:31898515】

来源细胞

  从患者提取的AMSC(miR-199a修饰)

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  透射电子显微镜/纳米颗粒示踪/

  流式细胞术/RT-PCR/WB

miR-199a有望成为改善肝细胞癌(HCC)化疗的新工具。使用来自脂肪组织的MSC(AMSC)的外泌体运载miR199a,研究其能不能改善HCC的化学感受性。结果AMSC外泌体是对miR199a送达有效的载体,对以mTOR途径为靶向的HCC的化学疗法有效。表明使用AMSC外泌体有助于改善HCC的化学感作性。

25

Muraoka, S, et al., Frontiers in neuroscience, 13, 1059(2019). Proteomic Profiling of   Extracellular Vesicles Isolated From Cerebrospinal Fluid of Former National Football League Players at Risk for Chronic Traumatic Encephalopathy.  全文【PMID:31649498】

来源细胞

  人脑脊髓液

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  Nanosight纳米颗粒分析/SDS-PAGE/

  NanoLC-MS/MS

调查了从患有认知・神经精神功能障碍的原运动员的脑脊髓液中分离出来的EV的蛋白质组成。表明了来自脑脊髓液EV中的第181位为磷酸化苏氨酸的tau蛋白质和几个细胞型特异分子的组合是慢性外伤性脑病的潜在的筛查生物标记。

26

Yuyama, K, et al., Scientific reports, 9(1), 16827(2019). Plant sphingolipids promote extracellular vesicle release and alleviate amyloid-β pathologies in a mouse model of Alzheimer’s disease. 全文【PMID:31727994】

来源细胞

  SH-SY5Y细胞

产品

  PS Capture Exosome ELISA Kit,
Anti CD9 antibody,
Aβ夹心法ELISA试剂盒(无具体货号)

实验应用

  SDS-PAGE/WB/GSL-糖链提取/

  MALDI-TOFMS/电镜观察/硫黄素T分析/

  ELISA

从一种叫做Amorphophallus konjac的植物中提取了一种叫做GlcCer的神经酰胺,可增加与Aβ结合的神经元EV的释放,并且共同培养的小胶质使细胞外Aβ含量降低了。另外,过量表达淀粉样前体蛋白的小鼠通过喂食含有GlcCer的植物,脑内的淀粉样蛋白的沉积以及与认知障碍等疾病相关的Aβ蛋白引发的症状均得到了缓和。表明了植物神经酰胺可能是防止阿尔茨海默等病的症状的功能性食品材料。

27

Sun, L, et al., Oxidative medicine and cellular longevity, 2019, 4506303(2019). Exosomal miRNA Let-7 from Menstrual Blood-Derived Endometrial Stem Cells Alleviates Pulmonary Fibrosis through Regulating Mitochondrial DNA Damage.  全文【PMID:31949877】

来源细胞

  人月经血来源干细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  投射电子显微镜/NTA/WB/荧光显微镜

使用人月经血由来干细胞(MenSC)外泌体将miRNA   Let-7运载到肺泡上皮细胞来改善肺纤维化,随后还发现ROS水平、LOX1表达、mtDNA损伤、以及炎症体NLRP3活性化也均被抑制。根据这些发现,MenSC外泌体可能有望成为治疗特发性肺纤维症的策略。

28

Muraoka, S, et al., Methods (San Diego, Calif.), 177, 35–49(2020). Assessment of separation methods for extracellular vesicles from human and mouse brain tissues and human cerebrospinal fluids. 全文【PMID:32035230】

来源细胞

  人脑组织/人脑脊髓液

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  NTA/投射电子显微镜/ LC-MS/MS/

  LC/ESI-MS/MS

我们开发了从未固定的脑组织和脑脊髓液中分离EV的标准实验方法。EV作为对疾病的检查和诊断的生物标记物很有前景,有望解决以往尚无对应处置方法的紧急性需求。

29

Jin, J, et al., BioMed research international, 2685305(2020). Exosomal miRNA-215-5p Derived from Adipose-Derived Stem Cells Attenuates Epithelial-Mesenchymal Transition of Podocytes by Inhibiting ZEB2.  全文【PMID:32149094】

来源细胞

  小鼠脂肪干细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  投射电子显微镜/WB/流式细胞术/qRT-PCR/

  显微镜观察

足细胞的游走与糖尿病肾病(DN)的发病密切相关。已知道脂肪干细胞的外泌体(ADSCs-Exos)可有效地阻碍足细胞的凋亡,但其机制依旧不明。本研究发现,来自ADSCs-Exos的miRNA-215-5p通过以DNA结合转录因子ZEB2为靶蛋白,抑制了足细胞的上皮间质转换。由此,ADSCs-Exo制剂被认为是临床改善足细胞功能障碍和DN症状的有效治疗战略。

30

Muraoka, S, et al., Cells, 9(9), 1959(2020). Proteomic Profiling of Extracellular Vesicles Derived from Cerebrospinal Fluid of Alzheimer’s Disease Patients: A Pilot Study. 全文【PMID:32854315

来源细胞

  人脑脊髓液

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS,

  Lysyl Endopeptidase®, Mass Spectrometry 

  Grade (Lys-C)

实验应用

  NTA/投射电子显微镜/纳米LC-MS/MS/MS

阿尔茨海默病(AD)中的含Aβ以及tau蛋白质的EV一直有被重视。我们调查健康者,轻度认知障碍者和AD患者的脑脊髓液中分离出来的EV,分析了其蛋白质组成。确定了参与AD进行的HSPA 1A、NPEPPS和PTGFRN三种蛋白质。这些蛋白质在对AD的发病、进展中是否具

31

Ren, Y, et al., Biosensors & bioelectronics, 199, 113870(2022). Rapid enrichment and sensitive detection of extracellular vesicles through measuring the phospholipids and transmembrane protein in a microfluidic chip. 全文【PMID:32149094】

来源细胞

  不明

产品

  不明

实验应用

  不明

研究开发了通过用亲油性色素对EV的磷脂双分子层染色来评价脂质质量的这一新的EV量测定方法。该方法中使用的小荧光分子不需要使用NTA与流式细胞术等预处理中不可或缺的超离心超滤等操作即可去除,并且该方法可以与NTA相匹敌。期望能通过这种方法获得关于EV生物标记表达的更准确信息。

32

Lim, K, et al., Journal of extracellular vesicles, 10(14), e12170(2021). Millisecond dynamic of SARS-CoV-2 spike and its interaction with ACE2 receptor and small extracellular vesicles. 全文【PMID:34874124】

来源细胞

  HEC50B/PC-9/A549

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  原子力显微镜/NTA/SDS-PAGE/WB

对SARS-CoV-2病毒的刺突蛋白和人ACE2复合体的pH/温度依赖性结构进行了分析。并进一步发现通过该复合体的形成使刺突蛋白的子单元S2与小EV更容易相互作用,由此期待应用该表达有ACE2的小EV来阻止病毒的侵入。

33

Shi, L. (2021). A Rapid and Label-free Method for Isolation and Characterization of Exosomes (Doctoral dissertation, University of Cincinnati). 全文

来源细胞

  不明

产品

  不明

实验应用

  Nanosight纳米颗粒分析/WB/电镜观察

文献37的研究的一部分

34

Mwase, C, et al., Cells, 11(2), 256(2022). Mechanical Compression of Human Airway Epithelial Cells Induces Release of Extracellular Vesicles Containing Tenascin C. 全文【PMID:35053372】

来源细胞

  人支气管初代上皮细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB

研究了模拟哮喘气管环境培养出的高分化型人支气管初代上皮(HBE)细胞中细胞外基质(ECM)蛋白质腱蛋白   C(TNC)的表达和分泌的论文。该HBE细胞产生了含有TNC的EV。本研究表明,由支气管痉挛引起的机械性压迫可能会诱发呼吸道中ECM蛋白质的产生,并有助于呼吸道重塑。

35

Osawa, M, et al., Anticancer research, 42(2), 745–757(2022). Exosomal p38   Mitogen-activated Protein Kinase Promotes Tumour Repopulation in TP53-mutated Bile Duct Cancer Cells. 全文【PMID:35093873】

来源细胞

  TP53变异吉西他滨敏感性HuCCT1细胞
吉西他滨耐性HuH28细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  投射电子显微镜/Nanosight纳米颗粒分析/

  细胞增殖分析/WB

研究了抗癌剂是否有助于TP53变异胆管癌细胞的肿瘤再增殖。比起对照组细胞,抗癌剂吉西他滨处理过的胆管癌细胞分泌了更多含p38MAPK的外泌体,通过被暴露在这些外泌体下进一步诱导了细胞增殖。已经表明,调节Exsom   p38MAPK可能是抑制TP53变异肿瘤细胞再增殖的有效战略。

36

Sawada, A, et al., International journal of molecular sciences, 23(4), 2036(2022). Tceal5 and Tceal7 Function in C2C12 Myogenic Differentiation via Exosomes in Fetal Bovine Serum. 全文【PMID:35216152】

来源细胞

  牛胎儿血清

产品

  anti-CD9
anti-CD81
(Exosome抽提使用了Exicon、System

   Biosciences、Thermo的试剂盒)

实验应用

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发现了牛胎儿血清中的外泌体抑制了Tceal 5、TSual   7基因的表达,从而阻碍了C2C12肌形成细胞分化的论文。期待今后能通过外泌体进一步调节肌肉分化和损伤肌肉的修复等尚不明了的领域。

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Zhang, Y, et al., Biosensors, 12(2), 104(2022). A Label-Free Electrical Impedance Spectroscopy for Detection of Clusters of Extracellular Vesicles Based on Their Unique Dielectric Properties. 全文【PMID:35200364】

来源细胞

  绿色荧光蛋白(GFP   +)转基因小鼠原代肝细胞
  人肝细胞癌HuH-7细胞系
人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)
乳腺癌上皮(MDA-MB-231)细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  NTA/qPCR/WB

本文开发了一种基于EV固有的电特性来分析评价EV的新系统。在基于绝缘体的介电泳装置中补充并固定小胞簇,利用电化学阻抗谱技术分析膜和细胞溶胶各自的电荷。这种方法是将电化学阻抗谱技术用作无标签和非侵入应用的第一步。

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Minami, Y, et al., bioRxiv(2022). Liver lipophagy ameliorates nonalcoholic steatohepatitis through lysosomal lipid exocytosis. 全文

来源细胞

  NASH模型小鼠血清

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS
LabAssay ™ Triglyceride
LabAssay ™ NEFA
ML-SA1

实验应用

  甘油三酯检测

关注了在NASH的治疗方法中由脂肪耗失引起的脂质减少。设计了诱导脂肪耗失发生的合成适配子,使之作用于NASH模型小鼠的肝细胞后,发现其促进了脂质的溶酶体的胞吐作用。并且,将其作用于食物诱导的小鼠NASH模型后,脂肪症和肝炎的症状均被大幅减轻。这项研究有望成为一种防止NASH进展的治疗方法。

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Muraoka, S, et al., Iscience, 104012(2022). Comprehensive proteomic profiling of plasma and serum phosphatidylserine-positive extracellular vesicles reveals tissue-specific proteins. 全文

来源细胞

  人血清/人血浆

产品

  Heparin   Sodium
TCEP Hydrochloride
Lysyl EndopeptidaseR (Lys-C)
Trypsin, Porcine, recombinant, Solution
MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2

实验应用

  NTA/透射电子显微镜/WB/

  纳米LC-MS/MS/RNA-seq

全面分析来自健康试验对象血浆、血清的EV蛋白质。血浆和血清之间构成的蛋白质虽然有差异,但这有助于判断在摸索脏器特异性疾病的生物标记物时应该使用血浆还是血清更好。健康的个人间的血浆、血清中的EV蛋白质组成差异的数据,可能对发现生物标记物有帮助。

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Shu, X, et al.,(2022). Photomodulation Alleviates the Senescence of Adipose-Derived Stem Cells Aging in Vitro. 全文

来源细胞

  小鼠脂肪干细胞

产品

  MagCapture Exosome Isolation Kit PS

实验应用

  WB

脂肪干细胞(ASC)疗法作为具有前景的治疗方法广受关注。本研究调查了光处理对ASC老化的影响。发现在光处理后的ASC中,老化相关基因的mRNA表达减少了。而且,如果将该ASC的外泌体暴露于老化的ASC,细胞周期停止相关基因的表达会减少。这表明光处理ASC有望成为预防细胞老化的方法。