抗LC3(克隆号:LC3・1703)单克隆抗体
Anti LC3 (Clone: LC3-1703) monoclonal antibody
应用于研究凋亡,线粒体形态和自噬的作用
◆背景
LC3B是哺乳动物Atg8同源物之一,广泛用作自噬体标记物。合成LC3后,LC3经Atg4处理变为LC3-I。诱导自噬发生时,LC3-I的C末端甘氨酸与磷脂酰乙醇胺结合,形成与自噬体膜结合的LC3-II,且大多数LC3-II位于自噬体膜上。而自噬体与溶酶体融合后,内部物质(包括LC3-II在内)融解。LC3-II的表达水平通常与自噬体的数量相关。
◆应用
1、免疫荧光显微镜下小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)
将小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)在添加有10%FBS(左)或无氨基酸(右)的常规DMEM中培养1小时。室温下用4%多聚甲醛固定10分钟后,再用50 μg/mL毛地黄皂苷透化5分钟。然后使用经1:100稀释的#1703抗LC3抗体对细胞进行免疫荧光显微镜检查。比例尺,20 μm。 |
2、免疫电子显微镜下小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)
将小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)放在不含氨基酸的DMEM中培养2小时。然后在室温下用4%多聚甲醛固定2小时,再用液氮透化。然后使用经1:10稀释的#1703抗LC3抗体对内源性LC3进行免疫电子显微镜分析(预包埋法)。金标记可通过银增强试剂盒(HQ silver enhancement kit,Nanoprobes,NY)强化。比例尺,50 μm。 |
仅供科学研究使用。 不可用于人类基因治疗或临床诊断。
参考文献
[1] | Kabeya, Y., Mizushima, N., Ueno, T., Yamamoto, A., Kirisako, T., Noda, T., Kominami, E., Ohsumi, Y. and Yoshimori, T. LC3, a mammalian homologue of yeast Apg8p, is localized in autophagosome membranes after processing EMBO J. 19, 5720-5728. (2000) |
[2] | Mizushima, N., Yoshimori, T. How to interpret LC3 immunoblotting Autophagy 3:542-545 (2007) Mizushima, N., Yoshimori, T. and Levine, B. Methods in mammalian autophagy research. Cell 140; 313-326 (2010) |