高灵敏度的脂滴活细胞成像荧光染料
LipiDye<Lipid Droplet Green>
LipiDye是一种可以对脂滴进行高灵敏染色的新型荧光素。与以往的脂滴检测色素Nile Red相比显示出高S/N比。活细胞和固定细胞均可使用。
※本产品用于研究,不可用于临床。
※本产品由名古屋大学转化生命分子研究所(ITbM)的研究成果商品化而来
Yamaguchi E., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 54:4539~4543 (2015).
◆脂滴(Lipid droplet)的含义
脂滴(Lipid droplet)是在脂肪细胞(Adipocyte)中发现的巨大的中性脂质的结块,主要成分是甘油三酯(Triglyceride)和甾醇酯(Sterol Ester)的单分子层结构体。脂滴被认为是储存细胞内中性脂质的细胞器,并且有较多肥胖和疾病相关的报道。最近,除了脂肪细胞,还在肝细胞、平滑肌细胞、神经胶质细胞等各种细胞中发现了脂滴。这些发现明确了其不仅仅是作为中性脂质的储存场所,还有抑制代谢和基因表达调节等各种功能。非脂肪细胞的脂滴在1μm以下,与脂肪细胞中的10~100μm的脂滴相比较小。目渐多评论认为,脂滴是每个细胞中都存在的普遍的小型细胞器。实际上,近年来与脂滴研究相关的研究报告数量显著增加(据Pubmed的调查)。
◆脂类自噬(Lipophagy):脂滴的自噬
自2009年Nature初次报道自噬是脂滴分解的过程之后*,脂类自噬(Lipophagy)作为自噬抑制的脂质代谢引起人们的关注。脂类自噬的形成以及活性化机制作为基于脂滴分解的脂质代谢的新过程,期待它可以有效地预防脂质异常的疾病。
*Singh, et al., Nature., 458: 1131-1135. (2009).
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脂滴的模拟图 |
脂滴研究的时间推移 |
◆特点
● LipiDye是依存溶剂的分子极性发光的荧光素,选择性地吸收脂滴,使其在中性脂质中发出绿色的荧光。
● 由于其在水溶液中没有荧光,所以细胞质中的非特异性发光被明显抑制,与以往的色素相比具有高S/N比。
● 也可用于脂滴的实时成像和固定细胞中的观察。
● 具有很高的光稳定性,是实时成像的理想选择。
● 低浓度的使用量(1 μM)就可获得足够地灵敏度,工作浓度(1 μM)几乎不显示细胞毒性。
◆化合物信息
● IUPAC name: 1,3-Diphenyl-2-[4-(N,N-diphenylamino)phenyl]benzo[b]phosphole-P-oxide
● 化学式 : C38H28NOP
● 分子量 : 545.58 g/mol
● 溶解度 : 可溶于DMSO
◆波长
Excitation/ Emission: 405 nm / 521~530 nm
※LipiDye用一般的绿色荧光色素使用的滤镜(FITC和GFP等)无法检测。请使用合适的滤镜。
检测试剂 |
活细胞 |
固定细胞 |
延时拍摄 |
多重染色 |
S/N比 |
LipiDye(本产品) |
○ |
○ |
○ |
○ |
高 |
Nile Red |
○ |
○ |
○ |
× |
低 |
荧光色素B |
○ |
○ |
× |
○ |
中 |
脂肪染色试剂T |
× |
○ |
× |
○ |
高 |
Oil Red O |
× |
○ |
× |
× |
低 |
◆使用案例
与Nile Red比较
脂肪细胞的脂滴用LipiDye或者Nile Red染色,检测箭头(左图)指示范围的荧光强度(右图)。无论是灵敏度还是S/N比LipiDye都比Nile Red高。脂滴中的荧光强度LipiDye较强(distance 0~10 μm),细胞质中的非特异性荧光信号Nile Red较强(distance 10~20 μm)。
脂肪前驱细胞3T3-L1细胞的分化
用LipiDye观察脂肪前驱细胞3T3-L1的分化过程。可以看出,分化过程中脂滴不断变大。
比较固定细胞
比较培养脂肪细胞用多聚甲醛固定后染色的情况(左图)和活细胞染色后用多聚甲醛固定的情况(右图),无论哪一种情况都可以高灵敏度地检测出脂滴。
※甲醇固定可能会影响到脂滴的构造,不建议使用。请使用多聚甲醛等的交联型固定试剂。
验证光稳定性
评价了LipiDye和BODIPY493/503、Fluorescein、Prodan随着照射时间的光稳定性。LipiDye与其他的荧光素相比显示出了较高的光稳定性。
验证细胞毒性
用MTT法评价LipiDye的细胞毒性。LipiDye几乎不影响细胞存活率。
产品编号 |
生产厂家 |
产品名称 |
包装 |
FDV-0010 |
FNA |
LipiDye <Lipid Droplet Green> |
0.1mg |
◆相关产品
功能
类别 |
品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 用途 |
细胞
凋亡 |
Wako | 016-16831 | Anti PARP, Monoclonal Antibody, Affinity Purified |
聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶
亲和纯化抗体100 μg细胞凋亡相关抗体
细胞
自噬
Wako030-23703Carbamazepine
卡马西平50 gNa+ 通道抑制剂,细胞自噬相关化合物Wako047-18863Dexamethasone
地塞米松1 g 干细胞分化相关物质,细胞自噬相关化合物Wako079-03811GF 109203X, 90.0+ % (HPLC)
双吲哚马来酰亚胺 I
(GF 109203X)1 mg蛋白激酶C选择性抑制剂,细胞自噬相关化合物Wako148-09431NF 449 Octasodium Salt10 mg嘌呤受体拮抗剂,对P2X1具有高选择性Wako146-08533Nocodazole
诺考达唑50 mg微管抑制剂。它具有抑制有丝分裂的作用。Wako163-18614Paclitaxel
紫杉醇100 mg微管抑制剂。它具有抑制有丝分裂的作用。Wako011-22533AICAR1 gAMPK激活剂,细胞自噬相关化合物Wako058-06841Epoxomicin100 μg蛋白酶抑制剂,细胞自噬相关化合物Wako131-176713-Methyladenine
3-甲基腺嘌呤1 g细胞自噬抑制剂Wako227-00753Vinblastine Sulfate
硫酸长春碱50 mg细胞自噬抑制剂Wako230-02341(+)-Wortmannin, 97.0+ % (HPLC)
渥曼青霉素2 mg细胞自噬抑制剂Wako092-05581Itraconazole
伊曲康唑5 g细胞自噬诱导剂Wako130-15485Metformin Hydrochloride
盐酸二甲双胍500 g细胞自噬诱导剂Biomol BML-PI102-0025MG-13225 mg–Wako188-02534Rapamycin
雷帕霉素50 mg细胞自噬诱导剂Wako205-17283
Thapsigargin
毒胡萝卜素
5 mg细胞自噬诱导剂Wako208-08243Tunicamycin
衣霉素50 mg细胞自噬诱导剂ENZOENZ-KIT175-0050CYTO-ID® Autophagy detection kit 2.0
Cyto-ID细胞自噬
检测试剂盒 2.0 50 tests细胞自噬荧光检测
LC3
研究
Wako034-17973Chloroquine Diphosphate
磷酸氯喹100 g自噬抑制剂,LC3研究相关相关化合物Wako164-17181Plumbagin1 g诱导G2/ M细胞周期停滞,LC3研究相关相关化合物Wako246-00921Xanthohumol5 mgVCP抑制剂,
LC3研究相关相关化合物Wako013-22831Anti Human Atg7, Rabbit50 μLLC3研究相关抗体
用途 | 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
脂滴染色 | 144-08811 | Nile Red |
病理研究用 | 25 mg |
140-08813 | 100 mg | |||
141-06822 | Nile Blue Hydrogensulfate | 病理研究用 | 25 g | |
154-02072 | Oil Red O
油红O |
病理研究用 | 25 g | |
192-04392 | Sudan Ⅲ
苏丹Ⅲ |
和光特级 | 25 g | |
194-07652 | Sudan Ⅳ
苏丹红IV |
和光一级 | 25 g | |
192-04412 | Sudan Black B
苏丹黑B |
和光一级 | 25 g |
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