Wako 297-78601 α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒

Wako 297-78601 α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒

食品分析用

 α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒

淀粉分解产生二糖,α-葡萄糖苷酶能分解二糖产生葡萄糖,使血液中的血糖升高。因此,可通过抑制α-葡萄糖苷酶来抑制血糖升高。

近来有研究表明从不同的植物体中可以检测到α-葡萄糖苷酶抑制物质,研究人员致力于将其应用到抑制血糖升高功能性食品的研究。

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒能测定对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。与LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒配套使用,可用于检测食品等成分中对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用。

◆试剂盒组成

试剂名称 容量 数量 主要成分
酶试剂 1 mL 2 α-葡萄糖苷酶
缓冲剂 50 mL用 2 马来酸/顺丁烯二酸二钠
基质液1 20 mL用 2 D-(+)-麦芽糖
基质液2 20 mL用 2 蔗糖
阳性对照 100 mg 1 阿卡波糖

*阿卡波糖是一种新型口服降糖药。在肠道内竞争性抑制葡萄糖苷水解酶。降低多糖及蔗糖分解成葡萄糖,使糖的吸收相应减缓,因此可具有使饭后血糖降低的作用。

◆除试剂盒外所需器具、器材

● LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒

● 96孔透明微孔板

● 酶标仪(505 nm吸光度)

● 微量移液管

● 恒温槽(37℃)

◆实验操作流程

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◆检测步骤

Ⅰ.配制试剂

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决定稀释倍数的预实验

麦芽糖 蔗糖
 基质溶液 麦芽糖溶液 50 μL 蔗糖溶液 50 μL
纯净水 25 μL
37℃,3分钟

(葡萄糖定量)

1.6孔微孔板中分别加入100 μL的酶反应液和稀释的葡萄糖标准液(浓度:15,10,5,2.5 mg/dl)添加150 μL LabAssay™ Glucose显色剂,充

分混合。

2.37℃下进行10分钟温育,测定505 nm的吸光度。

3.麦芽糖的葡萄糖生成量为10 mg/dL,蔗糖为5 mg/dL,以此求稀释倍率。

Ⅱ.正式试验(酶反应)

<样品配制>

麦芽糖 蔗糖
基质溶液 麦芽糖溶液 50 μL 蔗糖溶液 50 μL
样品溶液或阳性对照溶液
(对照组是纯净水)
25 μL
37℃,3分钟
酶稀释液 酶稀释液25 μL(根据预实验决定稀释倍数) 酶稀释液25 μL(根据预实验决定稀释倍数)
搅拌后,37℃下,准确反应30分钟
纯净水 400 μL
立即在沸水中加热3分钟后,冷却

 

<空白对照配制>

麦芽糖 蔗糖
基质溶液 麦芽糖溶液 50 μL 蔗糖溶液 50 μL
样品溶液或纯净水 25 μL
纯净水 400 μL
酶稀释液 酶稀释液25 μL(根据预实验决定稀释倍数) 酶稀释液25 μL(根据预实验决定稀释倍数)
立即在沸水中加热3分钟,冷却

Ⅲ.葡萄糖定量

  →同预试验,使用LabAssay™ 葡萄糖(血糖)检测试剂盒测定。

Ⅳ.IC50计算

1.以对照溶液的葡萄糖生成量为α-葡萄糖苷酶的100%活性,通过各浓度样品溶液的葡萄糖生成量,求α-葡萄糖苷酶比活性;

2.以样品或阳性对照溶液浓度(酶反应液中的终浓度)为横轴,以α-葡萄糖苷酶比活性为纵轴绘制半对数线图,从得出的近似曲线算出比活

性50%时样品的浓度(IC50值)。

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产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
297-78601 α-Glucosidase Inhibitory Activity Assay Kit
α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒
96 tests 食品分析用
638-50971 LabAssay™ Glucose 500 tests 细胞生物学用
194-17841 Salacinol Standard, Synthetic
Salacinol标准品,合成品
5 mg 食品分析用
043-24931 1-Deoxynojirimycin
1- 1-脱氧野尻霉素
10 mg 生化学用
020-12631 N-Butyl-1-deoxynojirimycin
N-丁基-1-脱氧野尻霉素
10 mg 生化学用
229-01891 Voglibose 10 mg 药理研究用
138-16221 Miglitol
米格列醇
10 mg 药理研究用

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