LBIS® 血蓝蛋白（KLH）（T细胞依赖性抗原）
大鼠免疫球蛋白M（IgM） ELISA试剂盒
药品的免疫毒性实验相关方针ICH S8中推荐在无特定免疫毒性标靶情况下进行的T细胞依赖性抗体产生实验（TDAR、T cell Dependent Antibody Reaction）。TDAR被称为T细胞依赖性抗原。例如：通过KLH（Keyhole limpet hemocyanin）的投放对一次抗原刺激而生成IgM性状抗体。接下来进行二次抗原刺激后通过类别转换作用可观察到产生IgG性状抗体。由于本试剂盒可简便测定大鼠血液中IgM性状的抗KLH浓度，所以十分符合上文所述的目的。请与大鼠抗KLH-IgG检测试剂盒配套使用。
◆特点
● 测定时间短（总反应时间：2小时20分钟）。
● 微量样本即可测定。
● 使用无害的防腐剂。
● 全部试剂为溶液即用类型。
● 高测定精度和高重复性。
◆试剂盒组成
|
组成品 |
状态 |
包装 |
|
KLH包被96孔板 |
清洗后使用 |
96 wells（8×12）/1个 |
|
抗KLH大鼠IgM标准溶液（1000 ng/mL） |
稀释后使用 |
200 μL/1瓶 |
|
缓冲液 |
直接使用 |
100 mL/1瓶 |
|
HRP结合抗大鼠IgM抗体 |
稀释后使用 |
100 μL/1瓶 |
|
显色液（TMB） |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
|
终止液（1M H2SO4）※小心轻放 |
直接使用 |
12 mL/1瓶 |
|
浓缩清洗液（10×） |
稀释后使用 |
100 mL/1瓶 |
|
孔板密封膜 |
3个 |
|
|
产品说明书 |
1本 |
◆物种交叉性
2000 ng/mL时数据—：无交叉性
|
动物种类 |
对象物质 |
反应性及反应率（%） |
|
大鼠 |
IgM |
100 |
|
IgG |
― |
|
|
IgA |
― |
|
|
IgE |
― |
|
|
小鼠 |
IgG |
― |
|
IgM |
― |
|
|
IgE |
― |
◆样本信息
● 大鼠血清·血浆
● 50 μL/well（稀释样本）
※ 用附带的缓冲液将样本稀释至标准曲线范围内。
※ 为了避免非特异反应发生，请将样本稀释200倍以上。
◆测定范围
3.13~200 ng/mL
（标准曲线范围）
◆实验数据
精度测试（组内变异）
|
样本 |
A |
B |
|
1 |
49.5 |
164 |
|
2 |
47.7 |
166 |
|
3 |
48.0 |
164 |
|
4 |
47.6 |
161 |
|
5 |
49.7 |
169 |
|
Mean |
48.5 |
165 |
|
SD |
1.03 |
2.93 |
|
CV（%） |
2.1 |
1.8 |
单位：ng/mL
重复性测试（组间变异）
|
测定日/样本 |
E |
F |
G |
|
0天 |
11.1 |
86.5 |
187 |
|
1天 |
11.1 |
86.1 |
188 |
|
2天 |
11.2 |
86.3 |
188 |
|
3天 |
11.1 |
83.3 |
186 |
|
Mean |
11.1 |
85.6 |
187 |
|
SD |
0.0576 |
1.48 |
0.814 |
|
CV（%） |
0.52 |
1.7 |
0.44 |
单位：ng/mL，n=4
加标回收测试
样本C
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
47.3 |
— |
— |
|
102 |
144 |
96.7 |
94.8 |
|
127 |
172 |
125 |
98.4 |
|
140 |
182 |
135 |
96.4 |
单位：ng/mL，n=2
样本D
|
添加量 |
实测值 |
回收量 |
回收率（%） |
|
0.00 |
34.8 |
— |
— |
|
16.8 |
51.9 |
17.1 |
102 |
|
25.2 |
59.5 |
24.7 |
98.0 |
|
42.0 |
76.7 |
41.9 |
99.8 |
单位：ng/mL，n=2
稀释直线性测试
2个血清样本连续用稀释缓冲液稀释3个梯度测定结果，直线回归值R2=0.9965~0.9998