定制高脂高果糖高胆固醇饲料/D09100301即AMLN饮食/D09100310 GAN饮食

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各种高脂肪饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 模型已被用于概括该疾病的某些病因学方面，2012年，Amylin Pharmaceuticals的研究人员引入了一种新型肥胖和纤维化小鼠NASH饮食模型。该模型的建立使用的是高脂高果糖高胆固醇饲料（40%脂肪供能、20%果糖供能、2%胆固醇添加）（对标D09100301即AMLN饮食）
随后该饲料在更多的饮食诱导的代谢综合征相关的模型中被广泛应用。然而，随着越来越多的证据表明反式脂肪的摄入对人类健康有负面影响，监管机构做出了一些改变，旨在限制人类饮食中人工生产的反式脂肪的摄入。FDA 于 2015 年将部分氢化油重新分类为不被公认为安全 (GRAS)，并于 2018 年 6 月 18 日禁止在大多数食品应用中使用它们，该禁令影响了AMLN饮食的关键组成部分起酥油的使用。
随后，用于替代AMLN的饮食（即D09100310 GAN饮食）在经过相关比较试验后被广泛使用，二者配方中的唯一显著差别仅在于GAN饮食使用了棕榈油来替代起酥油。
常见相关模型的建立及判定
胰岛素抵抗/高胰岛素血症（IR）
采食方式：自由采食，不做限制（按天换食）

造模周期：4-6周

成模判定：①空腹血糖（FBG）采用葡萄糖氧化酶化法；②血甘油三酯（TG）采用酶法；③空腹血胰岛素（FSI）采用放射免疫法按试剂盒要求测定；④ 按李氏方法计算胰岛素敏感指数（ISI）：ISI＝－ln（FBG×FSI）。
非酒精性脂肪肝（NAFLD）/肝炎（NASH）/肝纤维化
采食方式：自由采食，不做限制（按天换食）
造模周期：10-12周（NAFLD）/16周及以上（NASH）/20周及以上（纤维化）
成模判定：
1、视觉判定：非酒精性脂肪肝模型组肝脏相对与对照组，肝脏明显偏白或偏黄，对照组肝脏为鲜红或者暗红色

2、肝组织HE染色：用10%的中性甲醛溶液固定肝脏组织，脱水、包埋后，进行常规HE染色，光镜下观察大小鼠肝脏脂肪变性情况。

3、血清生化指标：检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）、总三酰甘油（TG）的含量。

4、生理学指标：肝指数=肝脏湿重（g）/体重（g）*100%

注：未完全表述的检测方法可以自行查询

动脉粥样硬化模型

采食方式：不做限制，自由采食（建议使用APOE鼠/LDLr鼠）

造模周期：8-12周

成模判定：

1、血清生化指标：采用生化分析仪器检测血清中总胆固醇（TC）、总三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）的含量

2、主动脉弓油红O染色：分离主动脉弓，纵向剪开主动脉，油红O染色后在镜下观察血管斑块情况。

3、主动脉HE染色：用10%的中性甲醛溶液固定肝脏组织，脱水、包埋、4℃保存，进行常规HE染色，光镜下观察大小鼠肝脏脂肪变性情况

高胆固醇血症模型

采食方式：不做限制，自由采食

造模周期： 8周左右

成模判定：与对照组相比，模型组 TC、TG 和 LDL-C 水平显著升高（P＜0.05），HDL-C 水平显著下降（P＜0.05），表明造模成功。

高脂高果糖高胆固醇饲料饲喂注意事项：

鉴于该饲料属于纯化型饲料，在适口性方面稍低于常规饲料，不做换食操作容易造成小鼠厌食、采食量低等情况，所以在开始饲喂时，需要进行换食操作步骤，目前有两个换食方法：

七天换食法：以逐步递增的方式增加高脂饲料在日常饲喂中的占比，直至全部替换，此方法比较温和（推荐）

断食法：给实验组小鼠直接断食24小时后，开始投喂高脂饲料，此法比较激烈，对一些特殊品系小鼠并不适用，但是节约时间、方便

高脂高果糖高胆固醇饲料因为果糖含量高及果糖的吸湿性特性，长期暴露在常规环境中，会快速吸湿变软，所以，要求做到每天或者两天投放，换食时，鼠笼中剩余的高脂饲料可作废处理，另外，需要监控每天采食量，以便及时发现异常，监控采食量数据很重要。

高脂高果糖高胆固醇饲料相对于常规饲料偏软一些，在条件允许的情况下，可以投放一些磨牙棒，便于小鼠磨牙使用。

Product #高脂高果糖高胆固醇饲料
gm% kcal% gm% kcal% gm% kcal%
Protein（蛋白质） 22.5 20 22.5 20 22.5 20
Carbohydrate（碳水化合物） 44.9 40 44.9 40 44.9 40
Fat（脂肪） 19.9 40 19.9 40 19.9 40
Total 100 100 100
kcal/gm 4.49 4.49 4.49
Ingredient（原料） gm kcal gm kcal gm kcal
Casein（酪蛋白） 200 800 200 800 200 800
L-Cystine（L-胱氨酸） 3 12 3 12 3 12
Fructose（果糖） 200 800 200 800 200 800
Maltodextrin（麦芽糊精） 100 400 100 400 100 400
Sucrose（蔗糖） 96 384 96 384 96 384
Cellulose（纤维素） 50 0 50 0 50 0
Soybean Oil（大豆油） 25 225 25 225 25 225
Lard （猪油） 20 180 155 1395 20 180
Primex Shortening（起酥油） 135 1215 0 0 0 0
Palm Oil（棕榈油） 0 0 0 0 135 1215
Mineral Mix S10026
（混合矿物质 S10026）		 10 0 10 0 10 0
Dicalcium phosphate （磷酸二钙） 13 0 13 0 13 0
Calcium Carbonate（碳酸钙） 5.5 0 5.5 0 5.5 0
Potassium citrate, 1 H2O
（柠檬酸钾一水合物）		 16.5 0 16.5 0 16.5 0
Vitamin mix,V10001
（混合维生素 V10001）		 10 40 10 40 10 40
Choline Bitartrate（酒石酸氢胆碱） 2 0 2 0 2 0
Cholesterol（胆固醇） 18 0 18 0 18 0
FD&C Red Dye #40 0 0 0 0 0.025 0
FD&C Yellow Dye #5 0.05 0 0.025 0 0 0
FD&C Blue Dye #1 0 0 0.025 0 0.025 0
Total 904.05 4056 904.05 4056 904.05 4056
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