Wako 高分子β-淀粉样蛋白寡聚体 ELISA试剂盒-阿尔茨海默病研究用
近年来,β-淀粉样蛋白(Aβ)寡聚体作为阿尔茨海默病因而倍受瞩目。众所周知,Aβ寡聚体是Aβ单体的可溶性凝集体,会抑制神经细胞的突触功能。
Aβ寡聚体中,按照分子量的大小,可以分成低分子量的Aβ寡聚体(Low-n 寡聚体)和高分子的Aβ寡聚体(ADDL、Aβ*56、原纤维(Profibril))。
有相关的报告指出,高分子Aβ寡聚体的Aβ*56(12-mer)对记忆损伤的影响极大1),在认知功能正常的成年人中,Aβ*56比二聚体、三聚体先增加并与Tau蛋白相关,二聚体、三聚体形式的Aβ不与Tau相关2)。
1) Lesné, S., et al.: Nature, 440, 7082, 352(2006).
2) Lesné, S. E., et al.: Brain,136, 1383(2013).
◆特点
可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量
◆试剂盒内容
① 抗体(BAN50)固相化96孔板——1个
② 标准溶液(10nM)——100μL
③ 缓冲液——60mL
④ 生物素偶联抗体(BAN50)溶液——100μL
⑤ 过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100μL
⑥ 显色剂1——6mL
⑦ 显色剂2——6mL
⑧ 洗涤液(10×)——100mL
⑨ 封板贴——3张
◆试剂盒功能
标准曲线范围 | 0.410~100 pM※1 |
反应Aβ寡聚体 | ≧9mer的Aβ寡聚体 |
检测对象样本※2 | 脑脊髓液
in vitro Aβ寡聚体 |
交叉反应 | 人 |
样本体积 | 25 μL(4倍稀释) |
检测时间 | 4.5小时 |
检测方法 | 发光法※3 |
※1 基于16-mer多抗原肽(MAP)标准品的换算值。
※2 不推荐使用血浆、血清作为样本。
※3 检测时需要准备酶标仪。
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
298-80101 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako
高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
◆检测原理
这种使用抗Aβ抗体(BAN50)进行捕获和检测的的双抗体夹心法ELISA系列,与1-8-mer几乎不发生反应,与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应3)4)。
使用带有16个抗Aβ抗体(BAN50)的抗原决定簇的16-mer MAP作为标准品4)。
3)Fukumoto, H., et al.: FASEB J.,24, 2716(2010).
4)Kasai, T., et al.: Biochem. Biophys.Res. Commun., 422, 3, 375(2012).
◆高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42冷藏于4℃并孵育一晚后,通过超滤将不足30kDa(8聚体以下)和大于等于30kDa(九聚体以上)的Aβ寡聚体分离,分别把回收到的片段进行Western Blot和本ELISA检测。
■ Western Blot(抗Aβ抗体(BAN50)) | ■ Aβ寡聚体ELISA |
→八聚体以下(<30kDa)的Fraction B几乎检测不到信号;九聚体以上(≥30kDa)的Fraction A则检测到强烈的信号。
◆检测案例——人脑脊髓液
用本ELISA法和其他公司的产品分别对非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病(AD)患者脑脊髓液中的Aβ寡聚体进行检测。
Wako产品 | 其他公司产品 |
MMSEscore※4 | FUJIFILM Wako Aβ寡聚体试剂盒(pM) |
其他公司 Aβ寡聚体试剂盒(pg/mL) |
|
Control1 | — | 0.98 | ND |
Control 2 | — | 1.99 | 33 |
Control 3 | — | 1.69 | 37 |
Control 4 | — | 4.59 | 88 |
Control 5 | — | 1.73 | 55 |
AD1 | 20 | 4.40 | 90 |
AD2 | 20 | 4.11 | 113 |
AD3 | 26 | 4.95 | 100 |
AD4 | 24 | 5.84 | 78 |
AD5 | 15 | 5.74 | 105 |
※4 MMSEscore:认知功能诊断问诊检查的评分
30-28分:正常; 27-24分:怀疑有轻度认知障碍; 23分以下:怀疑严重认知症
→本产品在检测非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病患者(AD)二者时的检测值有明显差异。另外,比其他公司产品检测非认知症患者(Control)和阿尔茨海默病患者(AD)群也有更明显的差异。
◆相关产品
■ Aβ ELISA试剂盒
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
292-62301 | Human β Amyloid(1-40) ELISA Kit Wako 人淀粉样蛋白抗体(1-40)ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
298-64601 | Human β Amyloid(1-40)ELISA Kit Wako Ⅱ 人淀粉样蛋白抗体(1-40)ELISA试剂盒II |
免疫化学用 | 96次用 |
294-62501 | Human/Rat Beta Amyloid(40)ELISA Kit Wako 人/鼠淀粉样蛋白抗体(40)ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
294-64701 | Human/Rat Beta Amyloid(40) ELISA Kit Ⅱ 人/鼠淀粉样蛋白抗体(40)ELISA试剂盒II |
免疫化学用 | 96次用 |
298-62401 | Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako 人淀粉样蛋白抗体(1-42)ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
296-64401 | Human β Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人淀粉样蛋白抗体(1-42)高灵敏度ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
290-62601 | Human/Rat Beta Amyloid(42)ELISA Kit Wako 人/鼠淀粉样蛋白抗体(42)ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
292-64501 | Human/Rat Beta Amyloid(42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人/鼠淀粉样蛋白抗体(42)高灵敏度ELISA试剂盒 |
免疫化学用 | 96次用 |
■ 抗Aβ抗体及抗APP抗体
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
017-26871 | Anti Human Amyloid β, Monoclonal Antibody(BAN50) 抗人β-淀粉样蛋白,单克隆抗体(BAN50) |
免疫化学用 | 10μL |
013-26873 | 50μL | ||
014-26881 | Anti Amyloid β, Monoclonal Antibody(BNT77) β-淀粉样蛋白,单抗(BNT77) |
免疫化学用 | 10μL |
010-26883 | 50μL | ||
018-26921 | Anti Amyloid β40, Monoclonal Antibody(BA27) 抗β-淀粉样蛋白40,单克隆抗体(BA27) |
免疫化学用 | 10μL |
014-26923 | 50μL | ||
014-26901 | Anti Amyloid β42(43), Monoclonal Antibody(BC05) 抗β-淀粉样蛋白42(43),单克隆抗体(BC05) |
免疫化学用 | 10μL |
010-26903 | 50μL | ||
014-27241 | Anti Human Apolipoprotein E4, Monoclonal Antibody(3F9) 抗人载脂蛋白E4,单克隆抗体(3F9) |
免疫化学用 | 10μL |
010-27243 | 50μL |
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