wako代理,wako提供各种标准琼脂糖Agarose S

琼脂糖

应用于核酸电泳的琼脂糖是从石花菜、江蓠等红藻中所提取的高纯度琼脂。

琼脂糖虽在分子生物学实验中较为常见,但其实种类繁多。为选择适合实验目的的琼脂糖,需检查以下项目。

凝胶强度

琼脂糖凝胶破裂所需的载荷用(g/cm2)来表示。标准琼脂糖约为≧1,200 g/cm2(浓度1.5%,Nippon Gene Agarose S)。分离高分子核酸时,需要使用低浓度琼脂糖,因此使用高凝胶强度的琼脂糖可更有效地制备凝胶。反之,在分离低分子核酸时,则使用凝胶强度低的琼脂糖。

熔点

琼脂糖凝胶融化的温度。标准琼脂糖的熔点在90°C左右,可通过引入羟乙基来降低熔点。这种低熔点型琼脂糖比双链DNA的变性温度要低,加热至65°C左右即会熔化,因此应用于DNA回收等。低熔点琼脂糖的胶凝化温度也比其他琼脂糖低。

硫酸含量

应用于电泳的琼脂糖由琼脂糖和琼脂胶组成,杂质琼脂胶中含有硫酸基团。因此,琼脂糖标准品中的硫酸含量表示琼脂糖的纯化程度,高纯度琼脂糖的硫酸含量表示为≤0.1-0.2%。

电渗度

琼脂糖因带有硫酸基等而带负电,接触的缓冲液带正电,两者极性相反。在这种状态下进行电泳时,带正电的缓冲溶液向阴极移动。这种现象称为电渗,也是琼脂糖凝胶电泳中迁移缓慢的原因。因此,一般使用电渗度低的琼脂糖进行电泳。

Nippon Gene Agarose 产品系列及正确使用方法

产品名

产品编号

凝胶强度 熔点 胶凝温度 硫酸含量 电渗度 分离范围 使用浓度范围 用途
Agarose S

318-01195

≧1,200g/cm2

(1.5%)

≦90℃(1.5%) 37-39℃(1.5%) ≦0.1% ≦0.1 0.5-30kbp 0.5-2% 标准琼脂糖。可制备的凝胶浓度范围广,成本低。
Agarose HS

312-01431

≧1,600g/cm2

(1.5%)

≦93℃(1.5%) 37-39℃(1.5%) ≦0.1% ≦0.1 0.5-30kbp 0.5-2% 凝胶强度高,Southern印迹的理想选择。
Agarose H

312-01431

≧2,600g/cm2

(1.5%)

Boil(1.5%) 37-39℃(1.5%) ≦0.2% ≦0.2 1-200kbp 0.2-1% 可制备高凝胶强度、低浓度的凝胶。分离高分子量核酸的理想选择。
Agarose XP

316-06515

≧450g/cm2

(1.5%)

≦65℃(1.5%) ≦30℃(1.5%) ≦0.1% ≦0.1 0.01-20kbp 1-4% 低熔点琼脂糖。凝胶温度低,容易回收核酸。
Agarose 21

319-03244

≧800g/cm2

(3%)

≦85℃(3%) 34-38℃(3%) ≦0.1% ≦0.1 0.01-1.0kbp 2-5% 溶解性优异,可制备高浓度凝胶。分离小分子核酸的理想选择。
Agarose X

313-02681

≧1,200g/cm2

(4%)

≦92℃(4%) 31-39℃(4%) ≦0.15% 0.06-0.14 0.01-1.0kbp 2-6% 溶解性优异,可制备高浓度凝胶。凝胶强度高于Agarose   21。

【参考文献】

1)電気泳動学会 編:「新版 電気泳動実験法」(文光堂)(1989).

2)大藤道衛 編:「電気泳動なるほどQ&A」(羊土社)(2007).

3)Green, R. M. and Sambrook, J.: ”Molecular Cloning A Laboratory Manual, 4th ed.”, Cold Spring Harbor Laboratory Press(2012).