Wako代谢疾病相关检测试剂盒——LabAssay系列

Wako的LabAssay系列试剂盒是利用实验动物进行生化检测的试剂盒。使用微孔板检测，仅需少量样品，即可同时进行多样品检测，检测常规的临床生化指标（蛋白，酶，脂类物质）。

LabAssay™ 系列产品是以人、小鼠等动物样品为检测对象的生化检测用试剂盒。使用微孔板检测，只需少量样品，一次可进行多样品检测。

※ LabAssay™ 系列产品仅供实验研究用，不可用于临床诊断。

LabAssay ™ Ammonia

◆LabAssay™ 氨检测试剂盒

氨主要在肠内、肾脏中产生。

生物体内生成的氨，通过肝脏的尿素循环变成尿素，从尿液中排出体外。

检测原理（藤井・奥田法变法）

氨与苯酚、催化剂五氰基亚硝酰基铁（Ⅲ）钠反应 ，转化为二氧二苯胺。二氧二苯胺在碱性条件下与次氯酸钠反应，生成靛酚。

本产品通过靛酚呈现的蓝色测定吸光度，以此计算样品中的氨氮浓度。

试剂盒组成

1. 脱蛋白液——100 mL×1瓶

2. 显色液 A——50 mL×1瓶

3. 显色液 B——25 mL×1瓶

4. 显色液 C——50 mL×1瓶

5. 氨标准溶液——15 mL×1瓶

6. 标准溶液用稀释液——20 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：100～400 μg/dL（μg/100 mL）
●　检测时间：约 70 min
●　所需样品量：70 μL
●　测定波长：630 nm

标准曲线示例

使用文献（例）

1）Inokuma, K. et al. : Microb. Cell Fact., 17, 153 (2018).

◆LabAssay™ ALP

◆LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

碱性磷酸酶（ALP）广泛分布于肝脏、骨骼和小肠等。尤其是在骨代谢的研究领域中，被用作骨形成标志物之一。

检测原理

本品为碱性磷酸酶检测试剂盒，以p–硝基苯磷酸为基质，通过测定在碱性磷酸酶作用下生成的 p–硝基苯酚含量，可测定碱性磷酸酶活性。

试剂盒内容

1. 基质片——10片

2. 基质溶解液——50 mL×1瓶

3. 终止液——50 mL×1瓶

4. 标准液——5 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：0.0625～0.5 mmol/L
●　检测时间：约 20 min
●　所需样品量：20 μL
●　测定波长：405 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Ito, S. et al. : J. Pharmacol. Exp. Ther., 333, 341 (2010).　※小鼠肾组织提取物

2.     Matsuyama, A. et al. : Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 45, 75 (2018).　※MC3T3-E 细胞，C2C12 细胞

3.     Chiba, T. et al. : J. Atheroscler. Thromb., 23, 1099 (2016).　※小鼠血浆

4.     Kohno, Y. et al. : Stem Cell Res. Ther., 8, 115 (2017).　※骨膜间充质干细胞

5.     Iwakura, T. et al. : J. Orthop. Res., 27, 208 (2009).　※人培养细胞提取物

6.     Furuya, Y. et al. : J. Biol. Chem., 286, 37023 (2011).　※小鼠血清

7.     Itoh, T. et al. : J. Biol. Chem., 284, 19272 (2009).　※小鼠培养细胞提取物

◆LabAssay ™ Cholesterol

◆LabAssay™ 胆固醇检测试剂盒

胆固醇是生物体细胞膜的主要成分，是许多动物类固醇合成的前体物质，被认为是造成动脉硬化等血管疾病的原因之一。

检测原理（胆固醇氧化酶・DAOS法）

胆固醇氧化酶与胆固醇反应生成的过氧化氢在过氧化物酶（HRP）的作用下，与N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3,5-二甲氧基苯胺钠（DAOS）、4 -氨基安替比林发生氧化缩合。

本试剂盒通过氧化缩合生成的蓝色色素检测吸光度，以此计算样品中总胆固醇的含量。

试剂盒组成

1. 缓冲液——150 mL×1瓶

2. 显色剂——150 mL 用×1瓶

3. 标准液——5 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：50～592.2 mg/dL（mg/100 mL）

●　测定时间：约 10 min

●　所需样品量：2 μL

●　测定波长：主波长 600 nm、副波长 700 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online　(2015) doi: 10.4172/2472-0992.1000113 　※小鼠肝脏提取物

2.     Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291　(2015).　※大鼠肝组织提取物

3.     Yoshioka, H. and Onosaka, S. : Fundam. Toxicol. Sci., 3, 151　(2016).　※小鼠血浆

4.     Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508　(2017).　※大鼠血浆

5.     Ushio, M. et al. : Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 305, E293 (2013). 　※小鼠组织提取物

6.     Kobayashi, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 74, 2385 (2010). 　※大鼠组织提取物

◆LabAssay ™ Creatinine

◆LabAssay™ 肌氨酸酐检测试剂盒

肌酐是一种由肌肉和神经中的磷酸肌酸直接产生或通过肌酸脱水产生，经肾小球过滤后排出体外的代谢产物。

检测原理（Jaffé法）

本试剂盒通过测定碱性条件下肌酐与苦味酸反应产生的橙红色色素，以此计算样品中肌酐的含量。

试剂盒组成

1. 脱蛋白试剂——150 mL×1瓶

2. 苦味酸试剂——50 mL×1瓶

3. 75 mol/L 氢氧化钠溶液——50 mL×1瓶

4. 肌酐标准溶液——15 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：2.5～10 mg/dL（mg/100mL）

●　检测时间：约 40 min
●　所需样品量：50 μL
●　测定波长：520 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Kawamoto, T. et al. : Glycative Stress Res., 3, 15 (2016).　※人尿

2.     Guan, Y. et al. : J. Pharmacol. Sci., 135, 81 (2017).　※小鼠尿液、血浆

3.     Ito, K. et al. : Biol. Pharm. Bull., 38, 1169 (2015).　※大鼠尿液、血浆

4.     Tahara, Y. et al. : Med. Chem. commun., 8, 415 (2017).　※小鼠血清

5.     Nasrin, S. et al. : J. Pharmacol. Sci., 122, 270 (2013).　※大鼠尿

6.     Toyama, K. et al. : Br. J. Pharmacol., 166, 1183 (2012). 　※小鼠

◆LabAssay ™ Glucose

◆LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒

糖是生物的重要能量来源之一，受到生物体内多种因子的调节。

在溶液中，葡萄糖的α型和β型维持在一定的比例内。

检测原理（变旋酶/GOD法）

通过与变旋酶作用，将α-D-葡萄糖转化为β-D-葡萄糖。β-D-葡萄糖与葡萄糖氧化酶（GOD）反应生成的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与苯酚和4-氨基安替比林进行定量氧化缩合。

本试剂盒通过氧化缩合生成的红色色素测定吸光度，以此计算样本中的葡萄糖浓度。

试剂盒组成

1. 缓冲液——150 mL×1瓶

2. 显色剂——150 mL 用×1瓶

3. 葡萄糖标准溶液Ⅰ——3 mL×1瓶

4. 葡萄糖标准溶液Ⅱ——3 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：50～500 mg/dL（mg/100 mL）
●　检测时间：约 10 min
●　所需样品量：2 μL

●　测定波长：主波长 505 nm、副波长 600 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Yamashita, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 77, 888 (2013).　※小鼠血浆

2.     Narita, T. et al. : Exp. Gerontol., 104, 127 (2018).　※大鼠血浆

3.     Yamasaki, M. et al. : Food Sci. Technol. Res., 21,　827 (2015).　※小鼠血清

4.     Fan, Y. et al. : J. Biomed. Sci., 23, 56 (2016).　※小鼠血清

5.     Wang, W. et al. : J. Renin Angiotensin Aldosterone Syst., 15, 384 (2014).　※小鼠血清

6.     Yamashita, Y. et al. : J. Nutr. Sci., 1, e2 (2012).　※小鼠血浆

7.     Maesako, M. et al. : Neurobiol. Aging., 33, 1011 (2012).　※小鼠血清

◆LabAssay™ NEFA

◆LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒

在血清中NEFA（Non-esterified Fatty Acid：游离脂肪酸）与白蛋白结合，被转运至外周组织，成为外周组织的重要能源来源。游离脂肪酸的浓度受到脂肪组织释放、外周组织消耗和肝脏摄取的调节。

检测原理（ACS・ACOD法）

游离脂肪酸在酰基辅酶A合成酶（ACS）的作用下生成酰基辅酶A（Acyl-CoA）。生成的酰基辅酶A与酰基辅酶A氧化酶（ACOD）反应生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与 3-甲基-N-乙基-N-（β-羟乙基）-苯胺（MEHA）和 4-氨基安替比林进行氧化缩合。

本试剂盒通过氧化缩合生成的蓝紫色色素测定吸光度，以此计算样品中的游离脂肪酸含量。

试剂盒组成

1. 显色剂 A——10 mL 用×4瓶

2. 显色剂 A 溶解液——45 mL×1瓶

3. 显色剂 B——20 mL 用×4瓶

4. 显色剂 B 溶解液——90 mL×1瓶

5. 标准溶液（油酸1 mEq/L）——7 mL×1瓶

※油酸 1 mEq=1 mmol

试剂盒性能

●　标准曲线范围：0.4～1.97 mEq/L
●　检测时间：约20 min
●　所需样品量：4 μL

●　测定波长：550 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Kobayashi, Y. et al. : J. Pharmacogn. Nat. Prod., online (2015) doi: 10.4172/2472-0992.1000113　※小鼠肝组织提取物

2.     Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291 (2015).　※大鼠肝组织提取物

3.     Ogawa, K. et al. : Reprod. Med. Biol., online (2018).　doi.org/10.1002/rmb2.12084　※猪卵泡来源的卵泡液

4.     Wang, F. et al. : J. Mol. Endocrinol., 52, 133 (2014).　※小鼠血浆

5.     Chang, Y. C. et al. : EMBO Mol. Med., 5, 1165 (2013).　※小鼠血浆

6.     Uchida, K. et al. : Exp. Anim., 58, 181 (2009).　※小鼠血清

◆LabAssay ™ Phospholipid

◆LabAssay™ 磷脂检测试剂盒

磷脂参与生物体内细胞膜的构成、脂肪的乳化/吸收以及血液凝固等重要功能。

检测原理（胆碱氧化酶・DAOS法）

磷脂被磷脂酶D水解后释放胆碱。生成的胆碱与在胆碱氧化酶下产生的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3,5-二甲氧基苯胺钠（DAOS）和4-氨基安替比林进行氧化缩合。

本试剂盒通过氧化缩合生成的蓝色色素测定吸光度，以此计算样品中磷脂的含量。

试剂盒性能

1. 缓冲液——50 mL×3瓶

2. 显色剂——50 mL用×3瓶

3. 标准溶液——5 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围：75～596.1 mg/dL
●　检测时间：约 10 min
●　所需样品量：2 μL

●　测定波长：主波长 505 nm、 副波长 600 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Xu, Q. et al. : Biosci. Biotechnol, Biochem., 77, 1390 (2013). ※小鼠肝脏粉碎液

2.     Tatematsu, Y. et al. : Biol. Pharma. Bull., 41, 319 (2018).　※脂质体

3.     Kuge, H. et al. : J. Biol. Chem., 289, 26783 (2014).　※脂质体

4.     Kessler, E. C. et al. : J. Dairy. Sci., 97, 5481 (2014). ※牛血浆

5.     Cheng, L. et al. : Transplantation, 90, 127 (2010).　※大鼠

◆LabAssay ™ Triglyceride

◆LabAssay™ 甘油三酯检测试剂盒

甘油三酯是由1分子甘油和3分子脂肪酸通过酯键结合而成的中性脂肪。甘油三酯、胆固醇、磷脂、游离脂肪酸和脂溶性维生素作为脂溶性物质存在于血液中。

检测原理

甘油三酯在脂蛋白脂肪酶和甘油激酶的作用下转化为 3-磷酸甘油。3-磷酸甘油与3-磷酸甘油氧化酶（GPO）反应生成的过氧化氢，在过氧化物酶（POD）的作用下，与N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3 ,5-二甲氧基苯胺钠（DAOS）和 4-氨基安替比林进行氧化缩合。

本试剂盒通过氧化缩合生成的蓝色色素测定吸光度，以此计算样品中甘油三酯的含量。

试剂盒组成

1. 缓冲液——105 mL×1瓶

2. 显色剂——105 mL用×1瓶

3. 标准液——4 mL×1瓶

试剂盒性能

●　标准曲线范围——100～888 mg/dL（mg/100mL）

●　检测时间——约 10 min
●　所需样品量——2 μL
●　测定波长——主波长 600 nm、 副波长 700 nm

标准曲线示例

参考文献（例）

1.     Gao, F. et al. : Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2015, 801291 (2015).　※大鼠肝组织提取物

2.     Funakoshi, T. et al. : Biochem. Biophys. Rep., 13, 39 (2018).　※大鼠原代肌肉卫生细胞

3.     Moser, V. A. and Pike, C. J. : eNeuro, 4, e0077-17 (2017).　※小鼠血浆

4.     Fujii, N. et al. : Aging Cell, 16, 508 (2017).　※大鼠血浆

5.     Wang, F. et al. : J. Mol. Endocrinol., 52, 133 (2014).　※大鼠血浆

6.     Kato, H. et al. : J. Hepatol., 60, 1032 (2014).　※小鼠肝脏提取物

7.     Fujimori, K. et al. : Prostaglandins. Other. lipid. Mediat., 94, 96 (2011).　※小鼠培养细胞提取物

◆肥胖·糖尿病相关试剂

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