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Wako和光纯药代理 164-21655 聚乙烯硫酸钾滴定液 (N/400)

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Wako和光纯药代理 164-21655 聚乙烯硫酸钾滴定液 (N/400)

Wako代理-上海金畔生物科技有限公司

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Wako和光纯药代理

货号：164-21655

英文名称：Potassium Polyvinyl Sulfate Titration Solution (N/400)

中文名称：聚乙烯硫酸钾滴定液（N /400）

CAS号：26837-42-3

Wako和光纯药代理 161-14695 0.0025N聚（二甲基二烯丙基氯化铵）溶液 26062-79-3

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Wako和光纯药代理 161-14695 0.0025N聚（二甲基二烯丙基氯化铵）溶液 26062-79-3

161-14695

 0.0025N Poly(diallyldimethylammonium Chloride) Solution

0.0025N聚（二甲基二烯丙基氯化铵）溶液

 for Colloidal Titration 500 ml 替代品：042-34455 26062-79-3

Wako NK细胞抑制剂使用说明书

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Wako NK细胞抑制剂使用说明书

Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

本产品只能用于研究，不能用于人的治疗。

◆原理介绍

Anti Asialo GM1(Rabbit)抗血清可以减少大鼠或者小鼠来源的自然杀伤细胞（NK细胞）的活性，NK细胞是免疫监视细胞。该抗体可以与NK细胞发生特异性结合，从而抑制NK细胞非特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞、同种异体移植的器官、组织等。可运用于药物筛选，器官移植，自身免疫疾病等研究。

每个产品有具体的体内外的滴定数据。

◆注射方法

小鼠-静脉注射：10-50μL（推荐20μL）具体剂量由滴度和规格而定。第一次注射在4天内有效，因此两周内需要注射3-4次。

大鼠-静脉注射：50-250μL（小鼠剂量的4或5倍）具体剂量还须考虑大鼠的健康状况、体重和NK活性。

小鼠和大鼠-腹腔给药：同等剂量或多于静脉注射。

◆产品信息

 

制备：

 

 从牛脑组织里提纯的Asialo GM1与甲基化牛血清白蛋白和弗氏完全佐剂一起使用，可进行反复免疫。用含有磷酸缓冲盐水（ph7.2）的50%硫酸铵透析后，得到血清里的丙种球蛋白（Gammaglobulin）片段。
内容： 含有唾液酸抗体GM1的兔血清50%硫酸铵盐析分层物（含蛋白量约10mg/mL）。
提纯法： 50%的硫酸铵盐析后 ，用含有磷酸缓冲液的生理盐水透析，然后冻干。
特异性： 作用于小鼠和大鼠的自然杀伤细胞；小鼠单核细胞（是一种不含自然杀伤细胞、骨髓、胎儿肝细胞和裸鼠脾脏巨噬细胞的肝细胞）；小鼠胎儿胸腺细胞（12日龄；生存率不断降低直到没有出现新生小鼠）（备注：如果浓度高，也能作用于成熟的T淋巴细胞）
免疫球蛋白类型： IgG、IgA和IgM
重组： 建议用蒸馏水（1mL）。由于该产品是使用盐来进行冻干的，如果用其它溶剂如PBS或MEM，就能增加其盐浓度。
抗体滴度： 通过免疫凝聚实验得出结果，抗体滴度比例约1 : 1,000
保存方法： 存储在2~10℃下
包装规格： 1mL样瓶
形状： 干冻品

◆应用案例

适用的动物模型 运用
肿瘤动物模型 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型内，研究抗肿瘤药物的作用机理。
肝纤维化动物模型 与治疗肝纤维化的药物混合后注入动物模型体内，研究抗肝纤维化药物的作用机理。
器官移植动物模型 器官移植后，会产生免疫排斥反应，机体内的免疫监视会清除”异己“的细胞和器官。可用于研究器官移植后使用的免疫抑制剂的作用机理
自身免疫疾病动物模型 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。
干细胞动物模型 抑制NK细胞的活性，从而有利于干细胞动物模型的建立。
糖尿病动物模型 研究炎症与糖尿病的关系。

NK细胞抑制剂——Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)(兔源)

Anti Asialo GM1的抗血清可以与NK细胞（自然杀伤细胞）结合，抑制NK细胞非杀特异性杀伤靶细胞的活性。靶细胞包括肿瘤细胞，同种异体移植的器官、组织等。可用于药物筛选、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK细胞属于天然免疫细胞，具有免疫监视功能。

特异性：与小鼠、大鼠的NK细胞，小鼠单核细胞（不含有NK细胞的肝脏细胞；骨髓；胎儿肝脏细胞；裸鼠巨噬细胞的脾细胞），胎儿T淋巴细胞（12天）

研究糖尿病的免疫治疗：

据报道，抗细胞凋亡细胞因子IL-15具有促进NK细胞和T细胞（包括调节性T细胞，Tregs）存活和激活上述两种细胞活性的功能。在患有糖尿病的NOD小鼠体内反复注射IL-15。如果每天一次，注射2周，既不抑制也不加速未处理NOD小鼠患糖尿病的情况。但是NK细胞活性丧失的NOD小鼠注射IL-15可以明显减少糖尿病的发病率和延迟糖尿病发病时间，但是NK细胞活性丧失不注射IL-15的小鼠依然病发糖尿病。在用IL-15处理，NK细胞活性丧失的NOD小鼠体内产生的保护效应与CD4+CD25+ Tregs免疫抑制活性增加有关。在该项实验中，用Anti AsGM1注射小鼠，抑制NK细胞活性，导致NOD小鼠NK细胞活性缺失。

摘自：Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139

研究败血症中NK细胞的功能

NK细胞和NKT细胞都属于天然免疫系统，但在细菌引起的败血症中这两种细胞的作用是有争议。用Anti Asialo GM1处理小鼠，成为NK细胞活性抑制的小鼠；用CD1d单抗处理小鼠，成为NKT细胞活性抑制的小鼠；同时用同型对照单抗处理小鼠，作为阴性对照。之后这些小鼠感染肺炎链球菌。分析血清和组织样品中细菌的含量，细胞因子，脾细胞凋亡率、用流式鉴定细胞，同时也分析脾细胞miRNA的表达。结果发现NK细胞活性抑制的小鼠延长了存活率。一旦NKT细胞激活抑制，与其他细胞群相比，脾脏的NK (CD3−/NK1.1+)细胞数目增加。NKT细胞活性抑制导致小鼠体内的细菌含量升高，导致血清和脾细胞IFN-γ水平升高。抗CD1d处理小鼠的脾细胞miRNA分析显示miR-200C和miR-29a下调，miR-125a-5p上调。这些变化发生在NK细胞活性抑制后。NK细胞可能与肺炎球菌肺炎的死亡率有关。抑制NKT细胞的激活导致(CD3−/NK1.1+)细胞数目增加，IFN-γ水平升高，改变脾细胞miRNA表达。

摘自Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015), Article ID 532717, 10 pages

研究肿瘤的免疫治疗

肿瘤的发展过程包括血管新生，肿瘤尺寸增大和肿瘤转移。使用CXCL14/BRAK (CXCL14) 转基因小鼠研究过度表达的CXC趋化因子配体14 (CXCL14) 在上述生物学现象中的作用。与野生型小鼠相比，转基因小鼠经AOM/DSS诱导的结肠血管新生的发病率显著低很多。肿瘤细胞注射到这些小鼠后，肿瘤尺寸发生变化。与野生型的相比，转基因小鼠肺中转移小瘤的数目明显少，

肿瘤的尺寸也明显变小。在注射肿瘤前后注射Anti Asialo GM1减少了CXCL14在肿瘤生长方面和肿瘤转移的抑制效应，表明激活的NK细胞在CXCL14介导的抑制肿瘤生长和转移期间起重要作用。CXCL14也表达在B16黑色素瘤细胞内表明NK细胞在肿瘤转移方面的重要性。而且转基因小鼠在注射肿瘤细胞后的存活率显著增长。这些转基因小鼠没有明显的不正常，预计肿瘤抑制/预防方面CXCL14起着重要作用。

摘自：Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083

 

动物模型 运用
肿瘤动物模型 与抗肿瘤药物混合后注入肿瘤动物模型体内，研究抗肿瘤药物是否通过激活NK细胞活性达到杀伤肿瘤细胞的作用。
肝病动物模型 与治疗肝病的药物混合后注入动物模型体内，研究药物是否通过激活NK细胞活性达到治疗肝病的效果。
器官移植动物模型 器官移植后会发生免疫排斥反应，机体内的免疫监视系统会清除：异己“的细胞和器官。可用于研究器官移植后免疫抑制剂的作用机理。
自身免疫疾病动物模型 研究治疗自身免疫疾病药物的作用机理。
干细胞动物模型 移植NK细胞活性，有利于干细胞动物模型的建立。

产品列表

产品编号 产品名称 等级 规格
014-09801(986-10001) Anti asialo GM1 (Rabbit)          NK细胞抑制剂 for Immunochemistry 1mL

WAKO 297-51501 SLP Reagent Set 蚕幼虫血浆试剂盒（细菌、真菌感染检测试剂盒）

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WAKO 297-51501 SLP Reagent Set 蚕幼虫血浆试剂盒（细菌、真菌感染检测试剂盒）

297-51501

 SLP Reagent Set

蚕幼虫血浆试剂盒（细菌、真菌感染检测试剂盒）

 for Microorganism Detection 3 mL 替代品：296-81001

Wako 065-06651 2-（2-呋喃基）-3-（5-硝基-2-呋喃基）丙烯酰胺 3688-53-7

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Wako 065-06651 2-（2-呋喃基）-3-（5-硝基-2-呋喃基）丙烯酰胺 3688-53-7

英文名称：2-(2-Furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)acrylamide
中文名称：2-（2-呋喃基）-3-（5-硝基-2-呋喃基）丙烯酰胺
品牌：Wako
CAS No.：3688-53-7
储存条件：室温
纯度：98.0+% (HPLC)

065-06651

 2-(2-Furyl)-3-(5-nitro-2-furyl)acrylamide

2-（2-呋喃基）-3-（5–硝基-2-呋喃基）丙烯酰胺

 Wako Special Grade 50 mg 3688-53-7

Wako和光纯药297-51501 SLP Reagent Set 3mL 替代品：296-81001

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Wako和光纯药297-51501 SLP Reagent Set 3mL 替代品：296-81001

SLP Reagent Set (真菌和细菌感染快速检测)
——肽聚糖和(1→3)-β-D-葡聚糖定量检测
家蚕的淋巴有一种自我保护机制，被称为“酚氧化酶原串联反应”。当受外界入侵（如细菌和真菌）时，
这个串联反应参与黑色素的形成并使机体免受攻击。这个反应由细菌中的肽聚糖或是真菌、酵母中的(1→
3)-β-D-葡聚糖引发，该反应中的酚氧化酶原被激活。也有人认为丝氨酸蛋白酶也参与了该反应，但是没
有从这方面阐述的资料。
已消毒的SLP包括了所有参与该反应的因子，再生后的溶液中含有L-3,4-苯丙氨酸(L-3,4-
dihydroxyphenylalanine, DOPA)，该物质可以作为肽聚糖或β-葡聚糖所激发的酚氧化酶的底物，DOPA被
酚氧化酶氧化，形成黑色素。肽聚糖是绝大多数细菌细胞壁的组成成分，而β-葡聚糖广泛的分布于真菌
的细胞壁中。因此，SLP通过测定黑色素的形成情况，进而定性或定量检测细菌和真菌的污染。
特点
1. 用于肽聚糖和(1→3)-β-D-葡聚糖的定量检测，检测敏感。
2. 使用酶标仪或内毒素检测仪，能对肽葡聚糖和β-葡聚糖精确定量。
3. 不需任何特殊器械即可通过肉眼检测出细菌和真菌的污染。
4. 冻干SLP的在2-10℃至少可保存18个月。
原理见：http://www.cxbio.com/news/news_details.asp?id=9588
当使用酶标仪或内毒素检测仪时，通过测定反应的始动时间和由颜色变化而导致的吸光度的变化，即可对
肽聚糖或β-葡聚糖进行定量。
所含试剂（所有试剂均存放于2-10℃）：
1. 冻干SLP             for 3ml
使用酶标仪或者目测约50Test，使用内毒素检测仪约30Test
2. 冻干底物             for 3ml
含有作为酚氧化酶底物的DOPA
3. 稀释液           4ml
含有good’s buffer
试剂准备：
(A) 底物中加入3ml稀释液，轻轻摇晃至底物完全溶解，注意避免碰到橡胶帽。
(B) 所有底物溶液加入冻干的SLP中，轻轻摇晃至SLP完全溶解，同样，注意避免碰到橡胶帽。此溶液即为
SLP检测液。
操作步骤
1.  使用酶标板(微孔板)目测
(A) 分别稀释肽聚糖和β-葡聚糖参照物，做两个不同浓度的参照系列，每孔加入0.05ml的参照物稀释液
或者待测样品
(B) 每孔加入0.05mlSLP检测液
(C) 温和摇晃后，酶标板于30℃孵育一小时
(D) 肉眼判断：反应液中有黑色素生成的为阳性，其它的为阴性。
(E) 参考物的最低浓度（即能生成黑色素的最小浓度）不应在SLP检测液的最低检测浓度以下。
(F) 样品中SLP反应物浓度是否在SLP检测液浓度的最低检测范围内，决定了样品是阳性或阴性。
2. 使用酶标仪检测
(A) 样品和参考物的稀释系列各0.05ml分别加入酶标板孔中
(B) 迅速在每孔中加入0.05mL SLP检测液。好用消毒过的加液器。
(C) 在以下条件下使用酶标仪上测定光吸收值：
检测波长：  650nm
检测模式：  动态检测
反应时间：  90分钟
检测温度：  30℃
自动混匀：  一次
(D) 绘制双对数回归(regression of Log-Log)标准曲线，横轴为SLP参考物的浓度，坚轴为反应时间
(E) 通过标准曲线上的反应始动时间，计算SLP反应物质的浓度。
3. 使用内毒素检测仪做SLP检测，其操作步骤可以按照仪器生产商提供的操作手册中所述的细菌内毒素检
测方法操作。内毒素检测仪可能会发出反应混合液缺乏透射光的信号。忽视这个的警告，测定结果不会受
此影响。
关联试剂：
297-51501   SLP Reagent Set    （定量的需要另配以下标准品使用）
162-18101   Peptidoglycan, from Micrococcus luteus肽聚糖    2ml
030-09903   Curdlan  (1→3)-β-D-葡聚糖    1g
注意事项
1. 器械应250℃干热灭菌至少2小时，并避免被SLP反应物污染
2. SLP冻干粉溶解后，其溶液应存于0-4℃,并尽早使用
3. 注意在器械储存期间避免其被SLP反应物质污染
4. SLP检测液的敏感性很大程度上受离子强度的影响
5. 该试剂盒仅用于研究，不可用于诊断；仅用于体外，不可用于人或动物体内。
（本资料只供参考，以原包装说明书为准）
常见使用说明：
1.      因为SLP是被PG（肽聚糖）或BG[(1→3)-β-D-葡聚糖]所引发，在操作和使用本试剂时，单一灭
菌器皿或者使用无热源器皿都不够的，必须还要同时无PG和BG；
2.      如果是用玻璃器皿，清洗干净后，需要在250度下干热灭菌2小时；
3.      如果是一次性无菌器皿，在使用之前必须进行测试能否适用于此项检测（即注1）；
4.      如果使用过后还有剩余，我们认为其很可能被样品污染，不建议继续使用。以前我们也遇到类似
的问题，但所有的都是因为污染造成。如果用户一定要保留一些SLP溶液，建议在未使用前进行无菌分装
并0-4℃保存；好是将SLP冻干粉在无菌无污染条件下，按照使用计划量预先分装后0-4℃保存。
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197-03345 Sodium Sulfate  500g

197-07125 Sodium Sulfate  500g

191-03985 Soluble Starch　和光一級  500g

199-16291 Stevioside Standard  100mg

196-00015 Sucrose  500g

191-04502 Sulfanilamide  25g

204-08343 Testosterone  5ｇ

203-00432 Tetraethylammonium Bromide  25g

205-00431 Tetraethylammonium Bromide  100g

208-16771 TFNG Standard  20mg

124-02275 Trilithium Citrate Tetrahydrate  500g

206-15591 Trinexapac Standard  200mg

190-05535 Trisodium Citrate Dihydrate  500g

208-09223 Trypsin Inhibitor, from Soybean  1g

028-03386 t-Butyl Alcohol 500ml

223-02112 VA-044  25G

226-01306 Vancomycin Hydrochloride  5g

302-07111 Vitamin E Reference Standard  1kit

234-01565 WakogelR 50C18  500ｇ

396-01731 XLD 日局試験用  300g

035-17981 α-Carotene Standard  10mg

354-03232 γ-Phenylpropyl Acetate  25g

242-00641 Xylobiose  100mg

334-30183 Z-Glu-Tyr  1g

263-00271 Zinc Chloride  10g

033-08332 α-Cyclodextrin  25g

034-13632 Chitin  25g

030-09903 Curdlan  1g

342-01875 EDTA-3NA  500g

030-05525 Citric Acid  500g

192-09071 Silicon Dioxide, 99.9%  100g

192-06031 Silicon Standard Solution  100ml

194-00832 Silver Nitrate  25ｇ

196-12781 Simeconazole Standar  200mg